抗汉坦病毒核蛋白细胞内抗体抗病毒作用的研究.pdfVIP

第 卷 第 期 病 毒 学 报 22 2 Vol . 22 No. 2 年 月 2 0 0 6 3 CHINESE JOURNAL OF VIROLOGY March 2 0 0 6 抗汉坦病毒核蛋白细胞内抗体抗病毒作用的研究 ! ! 王涛，李建东，张全福，李川，刘琴芝，梁米芳 ，李德新 （中国疾病预防与控制中心病毒病预防控制所，传染病预防控制国家重点实验室，北京 100052 ） 摘要：本文报道在内质网和细胞浆内稳定表达抗汉坦病毒核蛋白细胞内抗体，研究抗汉坦病毒核蛋白细胞内抗体 抗病毒作用及其抗病毒作用机理。在获得稳定表达抗汉坦病毒核蛋白细胞内抗体的细胞系的基础上，用MTT 法 检测细胞内表达抗汉坦病毒单链抗体对细胞增殖的影响，证实细胞内抗体的表达不会影响到细胞的生长。不同时 间收集病毒感染毒后细胞培养培养上清和细胞裂解物，用ELISA 方法检测细胞内外病毒结构蛋白含量的变化，结 果表明定位于细胞内质肉和细胞浆内的抗汉坦病毒核蛋白细胞内抗体均能不同程度降低感染细胞上清中的核蛋 白含量，但是不能或轻微抑制细胞内汉坦病毒核蛋白的合成。利用病毒微量滴定免疫荧光方法，对细胞内抗体与 病毒的增殖关系进行了研究，证实无论在内质网还是在胞质，抗核蛋白细胞内抗体都能够抑制病毒的增殖，具有抗 病毒活性。抗汉坦病毒核蛋白细胞内抗体不能抑制病毒结构蛋白的合成，其抗病毒效果是通过抑制病毒的包装而 实现。 关键词：汉坦病毒；核蛋白；抗病毒；细胞内抗体 中图分类号： + 文献标识码： 文章编号： （ ） R373 .3 2 A 1000 - 8721 2006 02 - 0089 - 07 汉坦病毒属于布尼亚病毒科汉坦病毒属，为分 于内质网和细胞浆稳定表达的抗汉坦病毒核蛋白细 节段的负链 病毒，其病毒基因组由 、 和 胞内抗体细胞系，感染汉坦病毒后研究其抗病毒作 RNA L M S 三个片段组成，分别编码病毒多聚酶、包膜糖蛋白 用，为研究汉坦病毒感染的机理奠定了基础。 、 和核蛋白。汉坦病毒引起的肾综合征出血 G1 G2 热主要发生在我国，临床病死率较高，至今没有特异 材料与方法 性药物治疗，且抗汉坦病毒感染的机理研究方面尚 载体与细胞 质粒 （ ）为单链抗体表 存在许多欠缺。因此，抗病毒感染机理以及新的治 ! pOPE - 101 - 215 Yol 达构建载体，具有 分泌信号序列及 个标签基因： 疗途径的研究具有理论和实际意义。 pelB 3 Yol- E ito e 为 EEGEFSEAR 9 个氨基酸残基的 Linker 序列、 细胞内抗体在细胞内特定部位表达，可与靶分 p p 和 个组氨酸标签，德国海德堡大学