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第十一届全国中药和天然药物学术研讨会 中国沈阳 2011．10
哈蟆油及其伪品定性和定量分析方法的研究
张嵩，常乐，张琳，袁丹木
沈阳药科大学中药学院，辽宁沈阳
chensinensis
目的哈蟆油(OviductusRanae)来源于中国林蛙(Rana David)雌体
temporaria
的干燥输卵管，具有补肾益精、养阴润肺的功效。本研究建立了哈蟆油及其伪品蟾蜍油、牛蛙油和
青蛙油的化学及生物学定性鉴别方法，以及总蛋白质、胶原蛋白、氨基酸、1．甲基海因和激素的含
量测定方法，为哈蟆油质量控制提供科学方法和实验依据。
方法测定不同产地哈蟆油及其伪品的性状、膨胀度、薄层色谱(TLC)和聚丙烯酰胺凝胶电泳
(SDS．PlAGE)色谱，比较各项定性鉴别结果；采用凯氏定氮法、氯胺T比色法、茚三酮柱后衍生化
．氨基酸分析法和高效液相色谱法，分别测定了不同产地哈蟆油及其伪品中总蛋白质、胶原蛋白、氨
基酸、1．甲基海因及雌二醇、雌酮、睾酮和孕酮等4种激素的含量。
结果①定性鉴别试验：哈蟆油的膨胀度范围为75．5~124．4，蟾蜍油、牛蛙油的范围为7．“36．1，
青蛙油的范围为52．5--,95．4，因此，药典规定哈蟆油的膨胀度不得低于55的试验法仅能将哈蟆油与蟾
蜍油、牛蛙油相区别，无法区别哈蟆油与青蛙油。365mnTLC图谱显示：蟾蜍油、牛蛙油在R，值O．24
附近有一明显的青白色斑点，而哈蟆油和伪品青蛙油无该斑点，因此，本TI．,C试验法可区别哈蟆油
与蟾蜍油、牛蛙油。建立的SDS图谱显示：哈蟆油有11条相同的特征谱带，而蟾蜍油、牛蛙
油和青蛙油的特征谱带分别有5条、6条和6条，且四者特征谱带的大小和位置有明显差异，因此，
SDS图谱可准确区别正品及其伪品。②定量分析试验：哈蟆油、蟾蜍油、牛蛙油和青蛙油的
总蛋白质含量范围分别为413．5--490．2，381．4,-406．0，243．4~365．7和399．6—475．0
mg值，因此，建议药
典应设定哈蟆油总蛋白质含量规格大于400
medg。哈蟆油中胶原蛋白含量范围为3．26--7．17毗。3
种伪品中含量范围为6．96-31．47mg／g，哈蟆油的胶原蛋白含量明显低于伪品。18种氨基酸测定结果
显示：哈蟆油中异亮氨酸含量范围为16．23~24．42
mg／g，明显高于伪品含量(7．73-14．69mg／g)。正品
啥蟆油及其3种伪品中均检测出1·甲基海因，含量范围分别为1．43-371．58
oe,／g和6．55-17．13甥绝，因
此，药典规定的哈蟆油1．甲基海因的鉴别试验项目有待修正。雌二醇、雌酮、睾酮和孕酮等4种激素
的HPLC含量测定结果显示，哈蟆油及其伪品中4种激素为微量。
结论本论文系统地研究了不同产地哈蟆油及其伪品的定性和定量分析方法，为国产哈蟆油及其
伪品的质量综合评价提供了详实的实验数据，对今后药典中哈蟆油质量标准的建立具有重要的参考
价值。
关键词：哈蟆油；伪品；SDS．PAGE：定性鉴别：l一甲基海因；蛋白质含量
·作者简介：张嵩(1986--)。女，辽宁大连人．硕士研究生，主要研究领域为中药质量控制的研究：衰丹(1963一)，女，
辽宁丹东人，博士，教授。主要研究领域为中药新药药用资源的研究。通讯方式：电话：+86-024真：
+86-024子邮件：yuandan_kampo@163．com
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