大鼠脑创伤后PI3K%2fAkt信号通路参与神经细胞凋亡的分子机制的研究.pdf

目 录 中文摘要………………………………………………………………………”1 英文摘要……………………………………………………………………………4 幽rou。研究’桫I兀 前言………………………………………………………………………………………………8日U舌………………………………………………………………………………………………8 材料与方法………………………………………………………………一9 结果……………··：……………………………………………………………………………·l8 附图……………………………………………………………………………………………·21 附表……………………………………………………………………………………………·36 讨论……………………………………………………………………………………………·39 参考文献…………………………………………………………………47 致谢……………………………………………………………………………………………………62 个人简历………………………………………………………………………63 ±查苎墨 大鼠脑创伤后P13K／Akt信号通路参-q神经细胞凋亡的 分子机制研究 摘 要 亡的分子机制，为临床上早期干预和治疗寻找新靶点，开拓新思路。 自由落下击中大鼠头部，造成大鼠中度弥漫性创伤性脑损伤。 1 实验动物及分组：SPF级健康雄性SD大鼠2 168h共7个时相点。 检测指标及方法：①神经功能损害评分；②lie染色镜下观察脑组织 蛋白表达量。 另取30只大鼠经过游泳训练后，随机分为假手术组，创伤+DMSO对 鼠伤后学习记忆功能。 6．0数码医 定量测定：免疫组化阳性细胞阳性度强弱用ImageProplus 学图像分析系统定量分析测定，以积分光密度值(IoD／触冱A)来表示； Western J图像处理软件分析测定，以目标OD值 blot蛋白定量分析用Image 与内参OD值的比值来表示。 统计学分析：实验中所得数据均用i±s表示，用SASV8统计软件进 行单因素方差分析，以单侧p0．05表示差异有统计学意义。 结果： 1生命体征变化大鼠打击伤后均有尿失禁及肢体肌张力增高表现。 60％伤后伴有一侧或双侧瞳孔扩大，持续2—5分钟恢复，50％存在后肢剧 烈抽搐，40％存在轻度抽搐、摆尾，持续O．5．1分钟。致伤后多数呈短暂 去大脑状态及呼吸抑制，无辅助呼吸条件下，致伤后1—4分钟恢复。本实 中文摘要 验大鼠死亡率为8％。 2形态学观察结果HE染色光镜结果显示：假手术组大鼠脑组织结 构正常，无蛛网膜下腔出血及脑室出血，血管管腔正常，管壁光滑，神经 细胞数量多，形态完整。创伤组大鼠脑组织可见不同程度的广泛蛛网膜下 腔出血或黄染，血管腔扩大，大脑皮层下广泛组织水肿，毛细血管充血， 血管壁增厚，血管腔塌陷，神经细胞变性，大脑皮层与深部白质交界区间 隙增宽，组织间质水肿、出血等改变。未见脑实质内出血及挫裂伤。 (Fig．6)。 3神经功能评分结果假手术组大鼠神经功能评分为24分。与假手 术组比较，创伤组大鼠在后肢抓持反射、触须诱发前肢定位及侧向垫步试 4 blot检测结果免疫组化结果显示：P．Akt P．Akt免疫组化及Western 阳性细胞形态不规则，胞核固缩，阳性产物呈棕黄色颗粒，主要定位于胞 浆，少部分定位于胞核。假手术组偶见P．Akt阳性细胞，着色浅淡，免疫 反应性不随时间发生变化。在DMSO对照组P．Akt阳性细胞着色呈深棕 黄色，在伤后6h表达显著增加，随时间推移阳性细胞逐渐增