电针对大耳白兔坐骨神经损伤修复中GAP-43的影响.pdfVIP

电针对大耳白兔坐骨神经损伤修复中GAP-43 的影响* 王瑞辉 张秋红 屈红艳 杜旭 ( 陕西中医学院，咸阳 712046 ) [摘 要] 目的：为探讨电针对周围神经损伤的治疗作用机制。 方法：选用 48 只大耳白兔随机分为 3 组（每组 16 只）：空白对照组、模型对照组、电针治疗组。 模型对照组、电针治疗组采用螺旋测微仪挤压造成右侧坐骨神经损伤模型。电针 治疗组在造模后第 2 天开始针刺“环跳”、“足三里”穴；模型对照组不做针刺治疗， 但与电针组同样进行动物抓取；空白对照组不做任何处理。分别于第 1、2 疗程 治疗结束后当天观察各组大耳白兔右后肢的功能状况，用免疫组织化学法检测各 组大耳白兔脊髓腰膨大处 GAP-43 含量。结果：1、2 疗程治疗结束后，电针组大 耳白兔右后肢功能改善明显；大耳白兔脊髓前角 GAP-43 阳性细胞表达数空白对 照组分别是 0.00±0.00 和 0.00±0.00，模型对照组分别是 16.83±2.06 和 6.37±1.41, 电针组分别是24.16±1.78 和 13.55±1.66.电针治疗组与模型对照组比较，有非常显 著性差异(P ＜0.01) 。结 论：电针能促进大耳白兔坐骨神经急性损伤后的肢体功 能恢复，其机理之一可能是通过增加损伤神经相应脊髓段组织中GAP-43 的合成， 以促进损伤神经的修复与再生和功能的恢复。 [关键词] 电针；坐骨神经损伤；生长相关蛋白（GAP-43 ） 坐骨神经损伤是很常见的临床疾病，显微外科的发展使坐骨神经损伤后的修 复步入了一个新的时代，但解剖上的修复还不能完全解决其功能的恢复，一些患 者遗留有感觉、运动功能障碍，严重影响工作和生活。如何促进周围神经损伤后 的再生和功能恢复已日益成为研究重点。针灸治疗临床具有一定的疗效，其治疗 的机理还不是十分清楚，我们在以往研究的基础上[1-3] ，本研究采用免疫组织化 学技术检测电针治疗对大耳白兔坐骨神经损伤后相应脊髓节段组织中（脊髓腰膨 大处）GAP-43 和 NCAM 含量，探讨电针治疗本病的机理，为针灸治疗周围神经 损伤提供理论依据。 1 材料与方法 1.1 实验动物 采用健康成年雄性大耳白兔 48 只，体重 2±0.2kg ，由西安市长安 区斗门实验动物养殖场提供，动物合格证号：SCXK （陕）2007-002 。 * 国家自然科学基金项目资助H2718） 381 1.2 主要试剂 兔抗兔 GAP-43 多抗（克隆号 BA0878 ，武汉博士德生物工程技 有限公司）；SABC 免疫组化试剂盒（型号 SA1022，武汉博士德生物工程有限公 司）；DAB 显色剂（型号 AR1022 ，武汉博士德生物工程有限公司） 1.3 动物分组及造模 48 只大耳白兔适应性喂养 1 周，称取大耳白兔体重后，以 体重从小到大排列进行随机分为 3 组，每组 16 只，分别是空白对照组、模型对 照组、电针治疗组。将模型对照组和电针治疗组大耳白兔逐只固定于兔台上，对 其右侧臀部及股前外侧部进行备皮，分别用 20%乌拉坦（5ml/kg ）静脉麻醉联合 盐酸利多卡因注射液（5ml ：0.1g ）局部浸润麻醉。麻醉后于右下肢后外侧无菌 操作，从股骨干直下 0.5cm，平行于股骨处切开皮肤，切口大约 3cm，向两侧分 离外皮和皮下组织，暴露出骨直肌及股二头肌，平股二头肌外缘水平线向下，钝 性分离筋膜，沿股二头肌深面用玻璃棒游离出 2～3cm 长的坐骨神经，用螺旋测 微仪卡口挤压坐骨神经，夹至 0.15mm 处保持 60s，松开 30s，再夹至 0.15mm 处 保持 60s （预实验中经病理切片HE 染色证实造成坐骨神经 Sunderland Ⅱ～Ⅲ度 损伤），后用大量生理盐水冲洗切口，逐层缝合伤口，无菌纱布覆盖，等待大耳 白兔复苏，术后连续7 天用青霉素进行抗感染处理，于下肢内侧肌肉注射 40 万 u×2 次/ 日。 1. ４ 处理方法 空白对照组：于室温 20～25 ℃动物房内、自由饮水及饮食条件 下喂养，不作其他任何处理；模型对照组：造模成功后相同条件下正常喂养，模 拟捉拿但不施加电针影响；电针治疗组：造模成功后相同条件下正常喂养，第 2 [4] 天开始电针治疗