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淮海工学院生物化学大实验报告niujun,生物化学实验,生物化学实验指导,生物化学实验报告,生物化学实验技术,食品生物化学实验,生物化学实验设计,基础生物化学实验,土壤生物化学实验室,生物化学实验设计方案
海 洋 学 院
综合大实验报告
专 业: 生物技术 班 级 生技121班
姓 名: newjhon 学 号:2 1
题 目: 生物化学大实验
指导教师: 孙玉英
2014-2015 学 年 第1学期
2014年12月22日 -- 2015 年 1月 2 日
酶的特异性及温度、pH对酶活性的影响
班级:生技121 姓名:牛军 学号:20121211111
【摘要】
本实验采用控制变量法分别研究唾液淀粉酶的特异性以及温度、pH对该酶活性的影响,得出结论:唾液淀粉酶对淀粉有水解作用;在37℃和pH 6.8时,酶的作用效果分别是最好的。
【关键词】唾液淀粉酶,温度,pH,特异性
1前言
唾液淀粉酶是由唾液腺分泌的一种水解酶,可溶性淀粉、直链淀粉、糖原等α-1,4-葡聚糖,水解α-1,4-糖苷键的酶碘化钾溶于蒸馏水中,待全部溶解后再加,振荡溶解。
2.2实验方法
2.2.1酶的特异性
(1)取两支试管编号①、②,①号加入0.5%的淀粉液2mL,②号加入0.5%的蔗糖液2mL;
(2)与两支试管各加入制备好的唾液1mL;
(3)将两支试管同时放入37℃恒温水浴锅中保温;
(4)15分钟后,取出两试管,各加入Benedict试剂1mL;
(5)将两试管同时放入沸水中煮沸6分钟;
(6)取两支试管,观察记录颜色的变化,并注意是否有红棕色产生。
表1 酶的特异性验证
试剂 管号 ① ② 0.5%的淀粉液(mL) 2 — 0.5%的蔗糖液(mL) — 2 制备好的唾液(mL) 1 1 37℃恒温水浴保温15min Benedict试剂(mL) 1 1 沸水浴6分钟→观察记录颜色的变化 2.2.2温度对酶活性的影响
①取三支试管并编号①、②、③,同时加入5mL0.5%淀粉液及1mL唾液混匀;
②将管 ①、管 ②、管 ③ 同时分别放入冰浴、37℃水浴、沸水浴中;
③15分钟后,取出各管,分别加入碘液数滴,观察并记录各管颜色变化。
表2 温度对酶活性的影响
试剂 管号 0.5%淀粉液(mL) 5 5 5 唾液(mL) 1 1 1 水浴(15min) 冰浴 37℃ 沸水浴 碘液 数滴 数滴 数滴 2.2.3 pH对酶活性的影响
①取试管3支编号6、7、8,按下表加入试剂;
②3支试管同时放入37℃恒温水浴锅内保温;
③15分钟后,取出3支试管,分别加入碘试剂数滴,每加一滴,注意摇匀,观察并记录颜色变化。
表3 pH对酶活性的影响
试剂 管号 ③ 0.5%淀粉液(mL) 2 2 2 pH1.5溶液(mL) 1 — — pH6.8溶液(mL) — 1 — pH9.8溶液(mL) — — 1 唾液(mL) 1 1 1 37℃恒温水浴保温15min 碘液 数滴 数滴 数滴 3结果与分析
3.1实验结果
3.1.1酶的特异性
实验现象:① 号试管经沸水浴后,试管内颜色仍为蓝色,但在试管底部可以看出有些许砖红色沉淀出现;②号试管经沸水浴后颜色没有发生变化(仍为浅
蓝色。(如图1)
图1 酶的特异性
实验现象表明:唾液淀粉酶能水解淀粉,而不能水解蔗糖。说明唾液淀粉酶具有特异性。
3.1.2温度对酶活性的影响
实验现象:①号试管加5滴碘液并混匀后颜色趋近与碘液原来的颜色,但较②号试管颜色较深;②号试管加5滴碘液并混匀后也趋近碘液本身颜色,但比碘液颜色浅;③号试管加5滴碘液并混匀后变成深蓝紫色。(如图2)。
图2 温度对酶活性的影响
实验现象表明:经过冰水浴后,唾液淀粉酶活性降低,但仍能将淀粉分解成葡萄糖;而在37℃条件下唾液淀粉酶活性较高,将淀粉分解成葡萄糖。说明低温对唾液淀粉酶活性有一定影响。经过沸水浴后,唾液淀粉酶变性,不能分解淀粉。
3.1.3 pH对酶活性的影响
实验现象:①号试管逐滴加入3滴碘液并混匀后变成酒红色;②号试管逐滴加入3滴碘液并混匀后接近碘液本身的颜色;③号试管逐滴加入3滴碘液并混匀后变成浅蓝黄色。(如图3)。
图3 pH对酶活性的影响
实验现象表明: pH为1.5(强酸性)条件下,唾液淀粉酶可以水解淀粉;pH为6.8(接近中性)条件下,唾液淀粉酶活性较高,能水解淀粉;pH为9.8(碱性)条件下,唾液淀粉酶仍能水解淀粉,只是较pH 1.5和pH 9.8 相比,酶的活性较弱。
3.2结果分析
本实验研究酶的特异性及温度、pH对酶活性的影响得到以下结果:唾液淀粉酶只能水解淀粉而不能水解蔗糖,验证了酶的特异性,与理论相符。在温度对酶活性影响实验中,
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