泽兰尾孢菌杀草毒素初步研究.pdfVIP

adenophorumSpreng。)是目前瞧界上煎爱的憨性杂革之 摘要：紫茎泽兰(Eutmtorium 一。长期驭泉对该杂萃靛薪治进行了大量静磷究势纛取得一定成栗，但是现有鹃控制 方滥仍然没辫完全阻止该杂革的扩展蔓延。研究获褥有效的院治方法鞠新型除草刘仍 然避该杂荤研究关液的热点。 擞生物及其代谢产犍除萃是匿髓灏型除孳剂磺发鲢一个覆点，本研究分离瘩然状 态下紫茎泽兰盱片环死组织中的微黛物，以紫茎泽兰为模型，筛选国产毒微生物，获 得对紫茎泽兰具鸯强致病力鹅产毒疆椿。在_l鲢：基础上探索该耱株戆最适产臻祭辞，礤 究该谪株产擞毒索的基本性质，并对毒素进行分离、纯化，为利用囊菌毒索撩制紫麓 泽兰翱耨型生褥澡除鼙裁扮辑发羹定基础。主要礤巍结果始下； (1)紫嫠泽兰叶片坏死组织相关微生物分离。本试验以云南省六个不同采集地 瓣絷莲泽兰豁廷缝织为耪辩，分离褥到褥个畿生物箧椿。缝初步鉴定分爨淹：邃毪 菌Cercosporaspp．(35株)，链格獭Alternaria spp． (5探)，稷霉Rhizopusspp．(8挺)，篷霉Aspergitlusspp，(霹橡≥，缀蓥(8拣)，其 它(20株)。屉示尾獭菌是谶南省紫箍泽兰叶片坏梦B组织的优势菌株。 痰斑。透过嚣蚕瘘缀织进蜇嚣凌分离，逡努离遗暴接释藩秣，{歪骥这8令蘩榷矮紫茎 泽兰的病原菌。 (3)馥漆产翡添犍生秘检嚣。麓离钵紫蓬泽兰时跨律誊溅耪瓣，采怒锌藕法辩 分离出的98个菌株发酵代谢产物进行活性缔避，发现有16个菌株(犏号为GM003、 襻籍豁毒素。通过铸鬻活毪对诧认为，GM017号菌株对离体紫茎泽兰叶片伤害作翔 最大，最具蒋研究和应用潜力。因此，本论文选用GM017母菌株作为杀孽瀵性代竣l 产物研究静树辩。遗遥对GM017号菌株培养性状和鼎微特褫的观察描述、藏微计铡 秘绘图，查瓣楣关文献资料，并与郭毙远等人对泽兰遐孢萤的描述对比，礁定荛泽兰 尾孢菌(CercosporaeupatoriiPeck．)。 (4)矮离体紫茎浮兰咛片佟生溅枣孝料，黠泽兰是熬蓥簿产霉条件进嚣傀纯硬究， 结果蔽明：PD培养液最利于泽兰尾獭菌产毒。在PD培养液中加入寄主紫熬泽兰叶 泞不糍对毒索晦产生觏活性越程进律瘸，趣发在一定程度上起舞截{乍露。泽兰蓬褒蘸 在培养液初始pH值为中性的PD培养液中，采用自然昼夜交替的光照条件鞠全振荡 的培葵方式发酵8d产毒量最离。 (5)泽兰蓬穗蓊毒素黼提液的基本穗质研究照示：舔索有较赢的耐热性，缀 孢麓簿素致瘸活性随满pH的增加而减小。谶毒素能溶于甲醇、无水已醇等檄性强的 夺极溶裁，燕不溶予嚣酸乙醚、蠢法醚等极绦弱畜搬溶蓑，说鹱该爨索是一类校性较 大的物质。 (6)浮兰尾孢麓凑豢专像性磺疯表爨：泽兰滗熬蓠毒索瓣毒主稳糁(紫整泽兰) 有伤害作用，对几种常见的a#寄主杂萆也有不同程度的伤害作用，遮说明该游素是一 耱嚣嚣主专纯瞧毒繁，其舂广潜瓣滁孳篷力。舅势，紫茎泽兰旗畸对毒素爱应浚逮、 灵敏，且能产生典型的受害癌状，是～种理想的生测材料。这些研究结果对于今后利 焉该卷素豫擎蠢一定指导意义。生测方法赣究聂示，与漫凌法、涂抹法穗毙，镑裁法 不仅威应速度快，而鼠用量少。 (7)采鼹系统溶蕤法蓊步努簧潭兰慝魏藩疆毒豢，薅室灏活援爨强靛嚣寨乙醇 萃取物进行谶胶柱层析(氯仿，甲醇梯腱洗脱)，再结合重结晶的方法，得到对紫茎潜 兰畜强致痪活性懿纛穗鑫钵；该鑫嚣辫程是104C一107℃，茹溶于翠簿、秃承乙醇、 丙酮，在乙酸五酯、粼仿中溶解性差，仅溶解少许毒豢晶体，在石油醚中溶解憔极小； 定注整定辑究寝臻；簿豫该螽律震予耱及箕鬣类、爵豢、鞣耩、生秘碱、毫甙、黄酮 及其贰类、慧醌及其甙类、甾体、萜类、氨基酸、多敝和蛋白质，属予有机酸必物质 翦可辘往较大；紫努撩播菱蕊，蘸钵程渡长219锄庭右有较强静碾收；域离效液稽 要酶嘲凌峰；谶一多静质谱分帮亍中发现，该杨艨质谱胬阮较棍乱，推测簿素晶体不纯： 用毛细管电泳分柝晶体出现7两个蜂，证明该燕体中含有鼹釉物质，怒混最，需要遴 一步分离笺纯。 关键诵：泽兰尾孢菌，紫茎泽兰，杀肇毒素，基本性质，分离纯化 Ⅱ ofthe weedsintheworldat