六医学研究方法学.ppt

* 毛果芸香碱诱导的急性和慢性癫痫模型 急性癫痫 慢性癫痫 四、动物保护 1．伦理学考虑 避免造成动物不必要的痛苦，必要时采用麻醉、镇静等措施。 2．动物保护 善待动物，给预良好生活、生存条件，保证动物的健康； 减少使用动物数量，避免不必要的动物牺牲 * * 3、忽视实验过程的细节 如给药时间、平行操作、实验时间段、环境对实验的影响、动物饲养条件（缺食、缺水）等 * 第四节 体外实验 一、体外实验的优点 二、体外实验的缺点 一、体外实验的优点 1.研究对象：活细胞 可长时期监控、检测甚至定量评估部分活细胞的情况，包括形态、结构和生命活动。 2. 研究条件可控制 3. 研究样本可达到相对均一性 4. 研究内容便于观察、检测和记录 5. 研究范围比较广泛 6. 研究费用相对较经济 * 二、体外实验的缺点 1. 体外培养的组织或细胞与体内相应者仍然存在差异 缺乏神经、内分泌系统、免疫系统等的调节 2．对人员、设备等条件要求较高。 * 三、体外实验所涉及的领域 1. 病毒学 2. 免疫学 3. 遗传学 4. 肿瘤学 5. 细胞学 6. 药理学 在细胞水平观测药效和作用机理 * * 在实验研究中容易被忽视的问题 1、设计的组别不完整，缺乏对照意识 对照组 正常对照、模型对照、阳性对照、处理组（不同剂量） * 2、实验设计忽视随机和均衡的原则 * 种属、品系、性别、年龄、不同产地 3、动物的选择 4、动物饲养条件 * 5、细胞株的选择 思考题： 在实验室实验设计中应该考虑哪些方面？ 设计一个联用整体动物和细胞培养系统来研究一种新型抗肿瘤药物的抗肿瘤作用及其机理的研究方案。 * 教学目的 * 在实验研究过程中需要根据实际情况，按研究因素和水平数量、实验组数等来选择设计方案。 * 1、含义 配对设计的扩大，按照一定的条件，将几个条件相同或条件近似的研究对象划成一个区组，而后在每个区组内部按随机原则，将每个研究对象分配到各组，每组分别予以不同处理，然后对其结果进行方差分析。 2、特点： ①配伍组设计属于两因素设计，它不仅能回答处理（第一因素）间的差异有无统计学意义，而且能回答区组（第二因素）间差异对实验结果有无明显影响； ②划分区组，实际上是分层，因而组间均衡性好，各处理组的研究对象相同、生物学特性也基本均衡，是对完全随机设计的改进，抽样误差较小，实验效率比较高； 3、应用范围 凡研究目的是回答两种因素（处理因素、配伍组因素）各自的差异有无统计学意义的情况，不管是两个或多个处理组，均可采用配伍组设计。 * 癫痫 是 神经精神科常见病、世界疑难病，从癫痫发作、并发症和药物的毒副作用 严重危害患者、家庭和社会。癫痫具有的突发性的特征，可随时随地，非常危险。癫痫的另一个特征是重复发作：如果一个癫痫病人得不到有效治疗，癫痫发作可重复出现，而且可以一次比一次严重。大家看看这些癫痫孩子的面部表情，他们显得多么的无助。 癫痫对青少年的危害特别大，一是他们占癫痫总人数的一半以上，二是癫痫疾病和药物的毒副作用严重阻碍了他们的身心发育和成长及各种能力的获得。 这是神经元同步化放电也称癫痫放电的示意图，当癫痫放电从病灶局部扩散传播开，就有癫痫发作的行为表现。现有药物主要是抑制癫痫放电或癫痫波的扩散从而控制点发作，而不是针对引发癫痫放电的原因，而且也抑制正常脑电活动，这就决定现有药物的缺陷。 * * （接上一张）：治标不治本、不能预防癫痫，多有严重毒副作用。可见，要研制出安全有效的抗癫痫药物必须摆脱这种以控制癫痫发作为目的，以抑制神经原的电活动为治疗原理的传统抗癫痫思维，建立新的抗癫痫策略并研发相关新药。 * 这是毛果芸香碱诱导的急性癫痫试验: 癫痫模型动物，FBP预防治疗动物。 设计主要原则：对照、随机、重复、盲法和均衡原则 * 幻灯片放映 ??????????????????????????????????????????????????? 实验室研究方法设计及实例 * 药学院 连晓媛 xylian@zju.edu.cn * 第一节 概述 一、实验室试验的优势、特点和局限性 二、实验室试验的受试对象 三、实验室试验的处理因素 四、实验室试验的试验效应 一、优势、特点和局限性 可以严格控制实验条件 可以缩短研究周期、进行对机体有害或可能有害的处理因素的研究 可以最大限度获取反映实验效应的样本和资料 可以进行药物长期疗效和远期效应的观察 可以进行临床上无法操作的实验 动物实验也有缺点，如动物机体结构、代谢特点等与人有较大差异。 * 二、受试对象 1．研究对象的选定 整体动物-体内实验研究 器官、组织、细胞、亚细胞或分子-体外实验研究 整体、离体、细胞、分子的有机结合 * 研究对象关系到实验室研究的成败 实验动物: 种属、品