急性出血性结膜炎的实验室检测(3页).docVIP

急性出血性结膜炎的实验室检测 一、病毒的分离与鉴定 （一）标本的采集、运送和保存 1．患眼结膜囊泪液、分泌物是分离CA24v、EV70的主要标本。标本采集应在起病1～3天以内。 2. 用灭菌棉拭子涂擦翻转的上、下睑结膜并拭取泪液立即投入装有灭菌生理盐水或Eagle液或0.5%水解乳蛋白Hanks液2mL的小试管中，贴好标签，置冰壶内携至实验室或低温（-20℃～-70℃）冻存。 （二）病毒分离 1．取出标本，无菌条件下揉洗棉拭子，压挤出标本液，加10％青霉素、链霉素（原浓度青霉素、链霉素各1万u/mL），置4℃作用4h后用作病毒分离。 2. 细胞培养用生长单层的HeLa细胞或人胚肺二倍体细胞或其他敏感细胞，生长液为10%牛血清Eagle液，含青霉素100u/mL，链霉素100u/mL，pH7.2-7.4。 3．倾去细胞管内生长液。每细胞管接种标本液0.2mL吸附10min。每份标本液接种4个细胞管。加维持液（含2%牛血清的Eagle液，PH 7.2～7.4）0.8mL/管。余标本液置-20℃或-70℃冻存。细胞对照管4管，每管加维持液1.0mL。37℃温箱静置培养。每日光学显微镜下观察细胞病变。3-4天更换维持液一次，连续观察7天。 4．细胞管出现细胞病变，表现为细胞圆缩、分散、胞浆内颗粒增加，最后细胞自管壁脱落，为分离阳性结果。细胞病变达“+++ - ++++”时，将细胞收留冻存于