第章RNA的生物合成秋季.pptVIP

中心法则（Central Dogma） 染色体模板假说认为，蛋白质是直接在染色体DNA上合成的？ 当确定核糖体是蛋白质合成的场所以后，Jacob和Meselson曾想过：会不会是rRNA作为翻译的模板，负责将核内的遗传信息传到细胞质呢？ 既然rRNA也不是传递信息的媒介，那么，在细胞内肯定存在其他成分充当这一角色。考虑到细胞内大多数RNA是rRNA，但并非全部，那么，也许细胞内还有其他RNA充当遗传信使。 主 要 内 容 第 一 节 参与转录的物质 DNA依赖的RNA聚合酶催化合成RNA； RNA合成的化学机制与DNA依赖的DNA聚合酶催化DNA合成相似。 DNA聚合酶在启动DNA链延长时需要引物存在，而RNA聚合酶不需要引物就能直接启动RNA链的延长。 RNA聚合酶和DNA的特殊序列——启动子(promoter)结合后，就能启动RNA合成。 其他原核生物的RNA聚合酶，在结构、组 成、功能上均与E.coli相似。 原核生物的 RNA聚合酶都受一类抗结核药利 福平或利福霉素的特异性抑制。这类药物能与 RNA聚合酶的?亚基特异结合，从而影响酶的活 性。 第一张RNA聚合酶全动态晶体图片 　　RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ都由多个亚基组成。 有些亚基是三种酶所共有。 mRNA是各种RNA中寿命最短、最不稳定的， 需经常重新合成。因此RNA聚合酶Ⅱ是三种酶中最 活跃的。 调控序列中的启动子(promoter)是RNA聚合酶结合模板DNA的部位，也是控制转录的关键部位。 原核生物以RNA聚合酶全酶结合到DNA的启动子上而启动转录，其中由σ亚基辨认启动子，其他亚基相互配合。 对启动子的研究，常采用一种巧妙的方法即RNA聚合酶保护法。 原核生物启动子 －35区：一致性序列为TTGACA 是RNA-pol的辨认位点 －10区：一致性序列为TATAAT 又叫Pribnow盒 是RNA-pol的结合位点 真核生物启动子 第 二 节 分为三个阶段： 起始(initiation) 延长(elongation) 终止(termination) 转录起始特点 ?因子辨认转录起始点，被辨认的DNA区域就是-35区的TTGACA序列。 辨认结合后，酶移向-10区的TATAAT序列并跨入了转录起始点。 转录起始不需要引物。 转录起始生成RNA的第一位多是GTP，RNA链5?端结构5?-pppGpN–OH 3?。 依赖Rho 因子的转录终止 非依赖Rho因子的转录终止 ρ因子 是由相同亚基组成的六聚体蛋白质，亚基分子量46kD。 ρ因子能结合RNA，又以对poly C的结合力最强。转录终止信号存在于RNA而非DNA模板。 ρ因子还有ATP酶活性和解螺旋酶(helicase)的活性。 ρ因子终止转录的机理：与RNA转录产物结合，结合后ρ因子和RNA聚合酶都可发生构象变化，从而使RNA聚合酶停顿，解螺旋酶的活性使DNA/RNA杂化双链拆离，利于产物从转录复合物中释放 。 顺式作用元件包括启动子、启动子上游元件等近端调控元件和增强子(enhancer)等远隔序列。 起始点上游多数有共同的TATA序列，称为Hognest盒或TATA盒(TATA box)。通常认为这就是启动子的核心序列。 许多RNA聚合酶II识别的启动子具有保守的共有序列：位于转录起始点附近的起始子(intiator，Inr) 。 启动子上游元件是位于TATA盒上游的DNA序列，多在转录起始点约-40～-100nt的位置，比较常见的是GC盒和CAAT盒。 增强子是能够结合特异基因调节蛋白， 促进邻近或远隔特定基因表达的DNA序列。 参与RNA-pol Ⅱ转录的TFⅡ 第 三 节 RNA聚合酶转录合成的RNA分子是初级RNA转录物(primary RNA transcript)，几乎所有的初级RNA转录物都要经过加工，才能成为具有功能的成熟的RNA。 帽子结构的意义： 帽子结构常出现于核内的hnRNA，说明5′-端的修饰在核内完成； 可以使mRNA 5′-端免遭核酸酶的攻击； 也能与帽结合蛋白质复合体(cap-binding complex of protein)结合，并参与mRNA和核糖体的结合，启动蛋白质的生物合成。 尾部修饰是和转录终止同时进行的过程。 一般真核生物在胞浆内出现的mRNA，其poly A长度为100至200个核苷酸之间，也有少数例外。 前体mRNA分子的断裂和加多聚腺苷酸尾是多步骤过程。 两种观点： 一、内含子有利于物种的进化选择。 二、