金域检验维生素D项目简介.pdf

广州金域医学检验中心维生素D 检测项目简介 一、 检测仪器 该项目采用国际一流的美国AB 公司的液相色谱串联质谱仪（API4000 ），进行血清 25 羟基维生素D 的检测，从而准确、高效的检出体内维生素D 营养水平。详细的仪器 参数如下： ESI 和APCI 离子源(非复合源) 电喷雾离子源（ESI）：流量1-2000μ l/min(无需分流) 大气压化学电离源（APCI ）：流量50-3000μ l/min(无需分流) 离子源接口适用于100%有机相到100%水相 三级四极杆串联型质量分析器 质量范围 m/z：5-3000 分辨率：≤0.5amu 质量数稳定性：≤0.1 amu/12h 定量范围：4*10 最大扫描速率：≥2400 amu/s 电喷雾离子源（ESI）正离子：1pg 利血平（reserpine）m/z 609195 信噪比2000:1 （峰峰比） 电喷雾离子源（ESI）负离子：50 pg 棉子糖（raffinose）m/z 503179 信噪比2000:1 （峰峰比） 大气压化学电离源（APCI ）：1pg 利血平（reserpine）m/z 609195 信噪比1000:1 （峰峰比） 检测器: 长寿命电子倍增器 扫描功能：全量程扫描、选择离子扫描、选择反应串联质谱扫描、子离子扫描、母 离子扫描、中性丢失扫描、多反应监测扫描（可同时分析300 对 MRM 离子）、混合扫 描、正/ 负离子快速切换扫描、自动MS 和MS/MS 切换扫描功能 真空系统：无油分子涡轮泵，空气冷却总抽速〉950L/s,雾化气体和碰撞气体要求简 单,无需额外氦气等特殊要求 二、 检测方法及试剂 该项目的检测采用液液萃取的前处理方法，最大程度的从血清中提取出待测物；通 过液相色谱法将待测物与杂质完全分离；最后采用串联质谱法进行定性定量。由于质谱 法的高特异性，使得该方法检测25 羟基维生素D 更准确、更快速、灵敏度更高。 为了最大限度的保障该项目的检测质量，我们采用了美国 SIGMA 公司的标准品和 内标品；采用德国RECIPE 公司的质控品。 为了保障方法的准确度，我们采用了美国标准化委员会给出的用于核查25 羟基维 生素D 检测方法准确度的标准物质SRM972 。 2.1 试剂 甲醇（Methanol）, Merck KGaA, HPLC 乙腈（Acetonitrile ）, Merck KGaA, HPLC 正己烷（Hexane）, Merck KGaA, HPLC 甲酸（Formic acid）, ≥88.0%, AR 25 羟基维生素D3 （25-hydroxyvitamin D3 ）, Sigma-Aldrich, ≥99.0%, HPLC 25 羟基维生素D2 （25-hydroxyvitamin D2 ）, Sigma-Aldrich, ≥98.0%, HPLC D6-25 羟基维生素D3 （D6-25-hydroxyvitamin D3）, Medical Isotopes D6-25 羟基维生素D3 （D6-25-hydroxyvitamin D2 ）, Medical Isotopes 2.2 仪器及厂商 质谱仪：API4000 Mass spectrometry (AB) 液相色谱仪： Shimadzu LC-20AD XR HPLC pump Shimadzu SIL-20A XR auto sampler Shimadzu CTO-20AC column oven 色谱柱： Agilent Poroshell 120 EC-C18 (Agilent, 2.1 x 100 mm, 2.7 µm particle size)