一种可降解黄原胶的鞘氨醇单胞菌的凝集活性.pdf

第21 卷第3 期 大 连 水 产 学 院 学 报 VOI. 21 NO. 3 2 0 0 6 年9 月 JOURNAL OF DALIAN FISHERIES UNIVERSITY Sep . 2 0 0 6 文章编号：1000 - 9957 （2006 ）03 - 0251 - 04 一种可降解黄原胶的鞘氨醇单胞菌的凝集活性 1 1 1 2 1 1 刘 晗 ， 孔 晶 ， 熊 川 男 ， 李 伟 ， 白雪 芳 ， 杜 昱 光 （1. 中国科学院大连化学物理研究所，辽宁大连 116023 ；2 . 大连水产学院食品工程系，辽宁大连 116023 ） 摘要： 采用血凝测试及血凝活性糖抑制测试方法，测定了一种可降解黄原胶的鞘氨醇单胞菌XT - 11 Sp hingomonas sp. 对红细胞的凝集活性及糖抑制专一性，同时进行了温度、pH 及Ca2 + 对红细胞凝集 活性影响的试验。结果表明：XT - 11 菌悬液能凝集家兔、家鸡两种红细胞，其凝集效价分别为26 和 24 ；菌悬液对兔红细胞的凝集作用可以被肝素所抑制；鞘氨醇单胞菌的凝集活性不依赖于Ca2 + ，且 在pH 为6. 0 ~ 10. 0 时较稳定，在温度为60C 时完全丧失凝集活性。这说明该菌含有能凝集红细胞的 活性物质。 关键词：黄原胶；鞘氨醇单胞菌；红细胞；凝集活性 中图分类号：@939. 99 文献标识码：A ［1］ 鞘氨醇单胞菌XT - 11 Sp hingomonas sp. 是一种新发现的可专一性降解黄原胶的细菌 ，具有一 定的工业应用前景。关于细菌可以凝集红细胞的研究已有报道，如Brucella sp. 是一种革兰氏阴性菌， ［2 ］ 它可以凝集人血红细胞，可使哺乳动物和人传染上地中海热并导致死亡 。另一种革兰氏阴性菌人 胃幽门螺旋杆菌 ［3 ］ Helicobacter pylori 也可凝集人血红细胞 。红细胞凝集活性测试方法广泛用于鉴定一 些细菌致病过程中的 “锁钥”结构。动物红细胞的表面存在着各种各样的糖蛋白和糖脂，因而使其 成为一种用于鉴别细菌粘附类型的工具［4 ］。本试验中，笔者采用血凝试验和血凝糖抑制试验，测定 了鞘氨醇单胞菌XT - 11 菌悬液对人和动物红细胞的凝集活性，以及温度、pH 及Ca2 + 对菌悬液凝集 活性的影响，旨在了解该细菌的粘附类型，为深入开展细菌凝集素分子水平的研究提供依据。 ! 材料和方法 !# ! 材料 试验用菌种系从大连湾滩涂中分离得到的，为兼性厌氧菌。人的B 型血样和小鼠由大连医科大 学提供，动物血样取自大连市长兴农贸市场。试剂黄原胶、酵母浸出粉、琼脂粉、蛋白胨、胰蛋白酶 均为美国Sigma 公司的产品，其它试剂均为国产分析纯。 !# $ 方法 1. 2. 1 TBS 红细胞悬浮液的制备 血样均取全血，用38 g/ L 的枸橼酸钠溶液抗凝，各抗凝血经2 000 r/ min 离心10 min 除去血浆，加入10 倍体积的TBS 溶液充分洗涤，然后离心3 min （1 000 r/ min ）， 去上清液，重复4 次。最后以2 500 r/ min 离心3 min ，一部分配成2% （体积分数，下同）的TBS - Ca2 + 红细胞悬浮液；另一部分配成不含Ca2 + 的2% 的TBS 红细胞悬浮液。