第七章蛋白质的加工和运输.pptVIP

第六节 蛋白质的加工和运输 * * * 由核糖体释放的新生肽链并不是一个完整的、有生物学功能的蛋白质分子，必需要经过处理和加工后，才具有生物学活性。包括形成高级结构、与其他亚基缔合及一些修饰。 此外，无论是原核细胞还是真核细胞，蛋白质除游离于胞质内发挥作用外，还有一部分要分泌到细胞外和定位于膜系统中起作用。这就涉及到运输的问题。 一些蛋白可自发形成成熟的构象。可通过变性-复性来检验蛋白的这一能力。可自发复性的能力称为自组装。能自组装的蛋白可从其它构象通过折叠或再折叠转变为活性构象。 其它蛋白不能自发折叠，而是通过分子伴侣（chaperone）的帮助获得正确的结构。 分子伴侣是介导靶蛋白只形成可能构象之一，以使其正确折叠的一种蛋白。作用通过防止形成错误构象，而不是促进生成正确构象。 一、 蛋白质折叠 热激蛋白（heat shock protein）70 系统：作用于新合成的、跨膜转运的和受胁迫变性的蛋白。 伴侣蛋白（chaperonin）系统：由一大的寡聚体装配组成。装配形成一未折叠蛋白插入的结构。 Hsp40（DnaJ）首先结合在新生蛋白上，辅助Hsp70（DnaK）折叠新生蛋白； Hsp70水解ATP，驱动构象转变； GrpE取代ADP，使分子伴侣从蛋白上释放。 Hsp60 GroEL 由14 个亚基形成两个7 聚体环，以相反方向垛叠在一起。 近端 远端 空心环（圆桶结构）与Hsp10（E.coli中为GroES）连接； 单个GroES在七聚体上形成一“屋顶”盖在空穴外。 底物和ATP结合在同一环； GroES盖住该环，近端环的中央空腔增大； GroEL的疏水残基参与与GroES的结合； 底物残基暴露在亲水环境，构象随之改变。 蛋白插入或穿过膜的过程称为蛋白易位（protein translocation）。 1.翻译后易位（post-translational translocation）：线粒体和叶绿体的大部分蛋白是在胞质中合成后再过膜转移进去的，这种蛋白质过膜方式称为翻译后易位。 2.共翻译易位（co-translational translocation）：与内质网结合的核糖体所合成的蛋白质前体，因在其N 端含有一个信号序列（信号肽）,可边翻译边进行转移。 两种易位的共同特征是N 端序列在移位过程中被切除； N 端序列组成：成熟蛋白质没有前导序列（leader） ，含有前导序列的蛋白称为前体蛋白（preprotein）。 二、 蛋白质易位 （一）翻译后易位 这类蛋白常有一段前导序列（leader），负责细胞器外膜的原初识别； 前导序列起始细胞器膜与前体蛋白的作用； 蛋白过膜后，先导序列被切除。 前导序列必须折叠成细胞器被膜受体所需的结构。 前导序列包含所有细胞器蛋白定位的信息。 如果把前导序列加到胞质蛋白中，则胞质蛋白可出现到细胞器中。 被转蛋白序列虽然与目标无关，但需要柔韧性以解除折叠。 前导序列的结构特征 TOM 聚合体的一般模型 翻译后易位的受体 TOM：位于细胞器外膜的受体； TIM：位于细胞器内膜的受体。 细胞质 Tim17-22 复合体 Tim17-22 复合体 Tim17-22复合体组成通道，与其它蛋白依次相连： Tim17-22～Tim44～Hsp70～Mge （Mge相当于细菌的GrpE） Hsp70对未折叠蛋白的亲和也有利于蛋白穿过内膜 护卫复合体 （escorting complex） 细胞质 膜间空间 衬质 蛋白通常直接从TOM 到达TIM 先导序列各部分决定蛋白的最终定位 外膜识别信号后直接将蛋白导入衬质，前导序列在此切除；如果蛋白还有其它定位信号，可被重新转运。 酵母细胞色素C1 具有定位于线粒体的N 端信号序列，和定位于内膜的信号序列。 （二）共翻译易位 核糖体与内质网相联，使蛋白质的合成和易位同时进行。 疏水核 牛生长激素的N 端的信号序列 共翻译插入由一段信号序列指导。 对以任何膜为目标的肽链，这段信号序列都是必需而且充分的。 胞质核糖体和内质网核糖体没有内在区别，核糖体的位置由合成的蛋白质有无信号序列决定。 核糖体在自由mRNA上起始合成蛋白质； 信号识别颗粒（signal recognition particle, SRP） 结合于前导序列，翻译暂停； SRP 与SRP 受体结合，核糖体附着在膜上；翻译继续； 核糖体合成分泌蛋白 前导序列进入膜； 蛋白穿过膜，前导序列被切除；翻译继续； 蛋白通过膜被分泌；核糖体从mRNA 上释放。 SRP 由蛋白质和小RNA 组成；分为几个结构域执行不同的功能。 蛋白通过亲水性通道穿过 ER膜，这一亲水通道称为易位子（translocon）。 三、 跨膜蛋白 跨膜蛋白的分类： I 类：N 端