深低温保存兔颈总动脉体外灌注后的结构和力学性能研究.pdfVIP

118 ChinMed 中国医药生物技术2007年4月第2卷第2期 Biotechnol，April2007，V01．2，No．2 ·论著· 深低温保存兔颈总动脉体外灌注后的 。 结构和力学性能研究 王沛涛，刘忠强，李强，付秀艳，李华琴 【摘要】 地保留深低温保存后组织和细胞结构与功能的完 目的 探讨深低温保存对动脉血管组织学和力学性能的 整性仍然是研究人员面临的难题，也是研究的热点 影响。 和重点之一。根据低温生物学的基本原理，深低温 mol／L 保存对于某种组织或细胞的影响，与组织或细胞的 方法取20只新西兰兔的颈总动脉，用含1．5 1，2．丙 二醇的低温保护剂深低温(一196℃)保存10～15d，并在 类型、大小、几何学和细胞膜渗透能力等密切相关， 预冷的冰袋内缓慢复温；以新鲜血管作为对照。对新鲜和冷 不同类型的组织和细胞具有不同低温生物学特性， 冻．复温血管的平滑肌细胞(sMc)进行体外培养，观察和直接影响降温冷冻中低温保护剂的渗透平衡、冰晶 h 的形成特点等，并决定深低温保存的效果【4j】。为了 分析新鲜、冷冻．复温和冷冻复温后体外灌注6、12和24 血管的内皮细胞、SMC、血管壁组织构和力学性能(轴向、 探讨深低温保存对动脉血管组织学和力学性能的 周向弹性模量和断裂应力)的变化。 影响，我们利用兔颈总动脉进行了深低温保存和冷 结果冷冻．复温后血管的SMC在体外培养中开始生长时 冻一复温后再罐注对血管内皮细胞、SMC、血管壁 组织结构和力学性能影响的研究，现报道如下。 间与新鲜血管基本相同(24～36h)，生长速度接近。深低 温保存后，血管内皮细胞数量减少，电镜观察SMC数量和 1材料与方法 形态无明显变化，但血管的轴向弹性模量(5．82±0．55)、轴 1．1标本来源和分组 向断裂应力(58．78±6．96)和周向弹性模量(1．44±0．22)、 周向断裂应力(3．45±0．40)均明显低于新鲜血管(分别为 体重2．5～3．0埏、4～6个月龄的普通等级新西 兰兔20只(雌、雄各10只)购自山东省农业科学 6．45±0．80、146．96土23．60和1．83±0．17、5．33±0．50， 院，合格证号0000765。以空气栓塞法处死动物， P0．05或P0．01)。体外灌注后，冷冻一复温血管的内皮细 胞脱落，SMC变性、坏死，内弹力纤维和胶原出现不同程 切取左右两侧颈总动脉，放入4℃Hanks液中。在 解剖显微镜下将结缔组织和脂肪组织仔细清理干 度崩裂，力学性能指标中除了轴向弹性模量外，均进一步降 净，并用Hanks液冲洗掉管腔内的血块。本试验中 低(P0．05或P0．01)。 兔颈总动脉长度约为10cm，通过有校准目镜的 结论兔颈总动脉SMC深低温保存效果满意，但体外灌 显微镜测量，外径0．919～1．333mnl，血管壁厚度 注对经深低温保存血管的内皮细胞、SMC和血管壁结构具