灵芝多醣体对于巨噬细胞的影响.pdfVIP

物理專文 藉由光鉗探討靈芝多醣體 對於巨噬細胞的影響 文/魏名佐、花國鋒、許喬威、柯孟楊、曾凱雩、許先業、邱爾德 近幾年，光鉗技術已被廣泛的應用在生物物理以及細胞生物的研究主題上。我們利用光鉗系統量測巨 噬細胞（J774A.1 cell ）與鍍有lipopolysaccharide （LPS ）的聚苯乙烯微粒間的作用力，並比較當細胞受到靈 芝多醣體（EORP ，extract of Reishi polysaccharides ）24 小時刺激後的變化。量測出經由靈芝多醣體刺激後的 巨噬細胞和鍍有LPS的微粒間結合時間的縮短以及黏附作用力的增加。此外，我們也利用共軛焦顯微鏡與流 式細胞儀證實受靈芝多醣體刺激過後的巨噬細胞，LPS接受器（CD14/TLR4膜蛋白）表現量明顯地增多。綜 合以上觀測，我們提出經靈芝多醣體刺激後，其巨噬細胞與LPS之結合以及對LPS之內吞能力均增加的論點。 關鍵字 ：光鉗、光學力顯微鏡、四象限位置感測器、光學彈力常數、光學力場、布朗運動、震動光鉗、巨 噬細胞、膜蛋白接受器、大腸桿菌、靈芝多醣體。 1. 簡介 LPS之間作用力變化。 中國傳統中草藥的書籍記載，靈芝可以用來促進 Ashkin 等人於 1986 年提出利用單一道雷射光 身體健康。近幾年來，生物科學的研究也證實靈芝中 束，藉由高度聚焦的物鏡（NA0.6 ），可以用來操控 的醣類的確能刺激許多重要的免疫訊息傳遞[1] ，其中 微 小 的 粒 子 ， 開 啟 了 單 光 束 光 鉗 （ Single Beam 靈芝多醣體（EORP ，extract of Reishi polysaccharides ） Gradient-Force Optical Trap, Optical Tweezers ）[4] 的研 的結構 [2]以及相關的免疫訊息傳遞均有充分的研究 究熱潮。而利用近紅外光(e.g., λ = 1.06µm)鉗住單一生 探討[2] 。巨噬細胞在免疫系統中是扮演舉足輕重的角 物體的可行性也很快的經由實驗證實。利用此項技術 色，細胞中重要的免疫蛋白IL-1也會因靈芝多醣體而 可以輕易對細胞生物做非接觸式的微操控，進而減少 產生誘發[3] 。巨噬細胞的兩種膜蛋白TLR4和CD14是 對生物體的機械性傷害 [5] 。藉由適當的光學力場計 辨識lipopolysaccharide （LPS ）的主要接受器，LPS是 算，實驗校準後[6-8] ，單光束光鉗可用來當作量測生 革蘭陰式菌細胞壁上的主要成分。了解TLR4/CD14和 物分子作用力的媒介（力量大約在 sub-pico-Newton LPS的作用機制對於初期的免疫系統調控是相當重要 到幾十個 pico-Newton ）。光學鉗住及微操控技術已被 的資訊。在這篇文章中，我們使用光鉗去探討靈芝多 廣泛的應用在生物物理以及細胞生物的研究主題上[9, 醣體（EORP ）對於巨噬細胞的影響，特別是觀測巨 10] 。而利用這項技術可以幫助我們探討生物物理的基 噬細胞上LPS接受器（CD14/ TLR4 ）的表現量以及與 本問題，如單分子作用力的研究及其相關應用就是一 個很成功的例子[11] 。 魏名佐 a 花國鋒 b 許喬威 a 柯孟楊 a 曾凱雩 b 許先業 a,b 邱爾德 a 2. 光鉗實驗架設 a 陽明大學生醫光電工程研究所 b 陽明大學醫學生物技術研究所 圖一為光學鉗住系統的實驗架設示意圖。一線性 E-mail: aechiou@ym.edu.tw 偏振的雷射光（λ = 1064nm, 300mW, Nd:YVO4 cw laser ）藉由旋