Rett综合征的基因突变检测.pdfVIP

可北医药2013年8月 第35卷 第 16期 HebeiMedicalJournal，2013。Vol35AugNo．16 2457 51． presstheactivityofhepaticstellatecells．ArchPharm Res，2006，29：762． 3 DemirciG，NashanB，PichlmayrR．Fibrosisinchronicrejectionofhuman 767． liverallografts：ExpressionPatternsofTransformingGrowthFactorTGF— 5 郑磊，戴立里．丹参素对转化生长因子B1刺激肝星状细胞信号转导 betalandTGF—beta3．Trnasplnatation，1996，62：1776—1783． 的影响．重庆医科大学学报，2009，34：182．185． 4 OhSH，ChoKH，YangBS，eta1．Naturalcompoundsfrom Dan—shensup— (收稿 日期：2013—03—17) doi：10．3969／j．issn．1002—7386．2013．16．028 · 临 床 研 究 · Rett综合征的基因突变检测 白欣立 窦志艳 卢燕 郭卓平 张松 【关键词】 Rett综合征；甲基CpG结合蛋白质2；基因突变 【中图分类号】R725．9 【文献标识码】 A 【文章编号】 1002—7386(2013)16—2457—02 Rett综合征(Rettsyndrome，砌=．I)多发生在儿童早期，主要 GT，MECP2外显子 4．3F：GGAAAGGACTGAAGACCTGT． 表现为早期发育正常，6—18个月后出现进行性发育障碍 ，手部 MECP2外显子 4．3R：cTrTGTCAGAGCCCTACCC．MECP2 出现技巧性动作障碍，语言功能部分或完全丧失。患者几乎均 外显子4长F：CGAGTGAGTGGCnI’GGTGA，MECP2外显 为女性，但近年也有男性病例报道 ，患病率约为 1／15000— 子4长 R：CGGTAAGAAAAACATCCCCA．引物均 由上海生 1／10000L3。 R1=．I1是一种性联遗传神经系统退行性疾病 ，呈 x 工生物工程技术服务有限公司合成。 染色体显性遗传，1999年 Amir等 确定位于染色体 Xq28的 1．2．3 PCR扩增反应及DNA测序：PCR反应总体积为50 l， MECP2基因是RrIT的致病基因以来，国外发现60％～90％典 含DNA200ng，上下游引物各 10pmol，dNTPs40mmol，10× 型和40％非典型R1-r患者存在各种基因突变 ，北京大学第 PCR缓冲液 (含 MgC12)5 l，DNA聚合酶 (TakaraTagTm) 一 医院诊断的R1T患者 中，典型患者该基因的突变检出率为 0．5U，在ThermoPCR热循环仪 (美国ABAppliedBiosystems， 84．3％一87．9％，不典型患者的突变检出率达57．1％ 【7。建 GeneAmp9700)上 94℃热变性 2．5min，94℃ 30s 52℃ ～ 立基因测定辅助临床早期确诊砌_r患者是十分必要的，本文报 65℃30s一72℃ 60S，循环38次，接 72℃延长 10min，4℃保 道2例我院儿科神经专科诊断的散发典型 Rrrr患者及父母基 存，琼脂糖凝胶电泳鉴定 目的PCR产物。将 PCR产物送上海 因突变检测方法和结果。 生工生物工程技术服务公司进行ABIPRISM377自动测序。 1 资料与方法 1．2．4 应用MutationSurveyor软件分析结果。 1．1 一般资料