紧密连接蛋白Claudin_6_Occludin与PKC_在脑膜瘤组织中的表达及.pdfVIP

细胞间紧密连接蛋白与肿瘤(综述) 紧密连接（tight junctions,TJs ）、粘附连接（adherens junctions，AJs ）、 桥粒和缝隙连接构成上皮和内皮组织细胞间的连接。TJs 主要位于上皮细 胞和内皮细胞的连接复合体中，在维持上皮细胞极性和黏附性，调节细胞 增殖分化、基因转录等过程中发挥作用。正常分化组织的细胞组成是高度 有序的，癌组织则通常缺乏这种特性，常表现为细胞黏附性丢失、凝聚力 降低、侵袭性增加等异常的 TJs，从而使肿瘤细胞离开原发部位通过血管 [1] 和淋巴管向远处转移 。 一、TJs的结构与功能 TJs位于上皮顶端两相邻细胞间，主要由跨膜蛋白和胞质附着蛋白两 种成分组成。跨膜蛋白claudins，occludin和紧密连接黏附分子（junctional adhesion molecule，JAM ）组成TJs 的跨膜结构。跨膜蛋白的细胞内部分与 胞质附着蛋白相连，细胞外的部分与相邻细胞的跨膜连接蛋白相互作用。 胞质附着蛋白（zonula occludins proteins ，ZOs ）是TJs支持结构的基础， 位于细胞质内膜表面，与绝大多数TJs蛋白以及细胞骨架相连。TJs具有封 闭细胞间隙、维持TJs特有的栅栏功能和屏障功能。栅栏功能是阻止两个 不同功能区之间的相互弥散且形成细胞极性。屏障功能则是对分子大小、 离子类型、细胞渗透性有选择性，可以调节胞间小分子的运输，维持组织 稳态。TJs还参与细胞增殖分化、基因转录、肿瘤抑制过程及多功能多蛋 [2] 白信息传递和调控 。 1.Claudins结构和功能 1998 年 Furuse [3]发现了两个新的完整的 TJs 跨膜分子 claudin-1 和 [4] claudin-2 。1999 年 Swisshelm 等 首先克隆了人类 claudin 基因。迄今，已 1 经发现 24 个家族成员，其序列的一致性为 12.5％-69.7 ％，分子量约为 20-27 kDa ，均由四个跨膜结构域组成，氨基和羧基末端都在细胞质内。 Claudins 有两个长度不等的细胞外环，claudins 分子第一和第四个跨膜片 段以及细胞外环的氨基酸序列具有高度保守性[5] 。Claudins 直接作用于 TJs 膜相关蛋白的鸟苷酸激酶同工酶、ZO-1 、ZO-2 、ZO-3 以及富含 PDZ 结构域的蛋白，并间接同肌动蛋白丝 AF 和菌环蛋白作用，维持 TJs 特有 的栅栏功能和屏障功能。 迄今，claudins 的确切作用仍不清楚，但可以确定 claudins 是构成TJs 的主要骨架蛋白。不同的 claudin 成员在各种组织中的分布及功能不同。 研究证明，TJs 中每一种 claudin 都有自身独特的细胞旁离子选择性[6] ， 这种独特的选择性增加了紧密连接的结构和功能的多样性，为不同组织类 型屏障功能的多样性提供了分子学依据。同时同种或异种 claudins 可形成 聚合体并与邻近 claudins 相互作用构成胞间连接骨架。 2 ．Occludins 的结构和功能 1993 年 Furuse 等分离出第一个 TJs 跨膜蛋白，称 occludin 。序列分 析发现 occludin 是一个分子量为 60KD 的蛋白质，包括四个跨膜区，形成 2 个细胞外环及中间 1 个小的细胞内环。第一个细胞外环含近 61%酪氨酸 和甘氨酸残基，而第二个细胞外环仅含有 18%的酪氨酸残基，但两者都呈 电中性。Occludin 在胞质中一个长羧基末端最后 150 氨基酸形成α螺旋， 可以与 ZO-1 、ZO-2 、ZO-3 及 PKC-ζ、c-Yes 和缝隙连接蛋白（Connexin， CX ）26 的调控亚单位相连，同时直接与 occludin 自身和肌动蛋白相互作 用[7-11]。Occludin cDNA 序列在人、鼠、狗间具有 90 ％同源性，表明哺乳 动物的闭锁蛋白在进