非小细胞肺癌p27-%27kip1-CyclinD-%2c1-和增殖细胞核抗原表达和临床病理关系研究.pdf

中文 摘 要 非小细胞肺癌p27k0CycIinD、和增殖细胞核抗原的 表达及与临床病理关系研究 摘 要 目的:肿瘤是严重危害人类健康的恶性肿瘤，近年来， 发病率呈逐年上升趋势，肺癌的预后很差，死亡率很高，这 与大部分患者缺少明显症状而未能及时诊断和治疗有关。因 而有必要找一个新的诊断与预后标志物来准确反映这种恶 性肿瘤的生物学行为，进而指导肺癌的临床诊断与治疗。寻 找肺癌的早期诊断指标，正确估计预后已成为肺癌研究的重 点。 现代肿瘤分子生物学研究表明，细胞周期调节基因的异 常表达与肿瘤发生密切相关。肺癌的发生是一个多步骤、多 阶段、多基因的复杂生物学过程，癌基因的激活和抑癌基因 的失活是其发生的重要机制，细胞周期失控是细胞增殖失控 而导致癌变的重要原因口有关研究发现，CyclinD、在一些人 体肿瘤中有过度表达，提示 CyclinD，可能与肿瘤的发生有 关。p27kip基‘因是近年来发现的一种肿瘤抑制基因，它的表 达产物广泛抑制多种细胞周期蛋白和激酶的活性，影响细胞 周期G，期调控，从而抑制了细胞增殖和肿瘤形成。其蛋白表 达及抑癌作用己在国外展开研究，国内报道甚少。增殖细胞 核抗原 (PCNA)是一种与细胞增殖状态相关的核蛋白，它是 DNA复制和修复所需的DNA聚合酶的辅助蛋白质，对于评价 细胞增殖状态研究肿瘤的生物特性，判断患者的预后等具有 一定价值。 中文 摘 要 肿瘤的发生是一个多基因参与的过程，目前有关 p27,CyclinD,、PCNA的异常表达及与肿瘤发生发展关系 的研究报道多数是指针对某一个癌基因的变化，且结论多不 一致。它们在非小细胞肺癌的研究较少，且结果尚有争议， 而同时涉及三者在非小细胞肺癌中的表达及相互关系的研 究，国内外尚未见报道。本研究旨在通过检测p2产p、 CyclinD,、PCNA在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达，以探讨 三者在NSCLC发生发展中的作用及其与临床病理特征的关 系，为进一步研究NSCLC发生发展机制、诊治和评价预后提 供必要的理论依据。 方法:收集1997年一2001年间省胸科医院、省四院存 档的手术切除肺癌蜡块标本60例作为实验组，癌旁肺组织 15例作为对照组。年龄为37一80岁，平均年龄58.5岁，所 有病例术前未经放疗和化疗。全部标本经 10%中性甲醛溶液 固定，梯度酒精脱水，石蜡包埋，5um连续切片，常规HE染 色。按WHO标准进行肺癌组织学分类，按国际抗癌联盟标准 进行病理学分级和PTNM分期。由同一名有经验的病理医师 进行病理组织学诊断。切片应用微波进行抗原修复，然后分 别对每例标本采用 SP免疫组织化学方法检测 p27k,n,、 CyclinD,、PCNA的表达水平，用DAB液进行显色，苏木素 复染，光镜下观察。实验资料应用SPSS10.0统计软件进行 统计分析采用x2检验及相关性检验，pO.05时认为差异具 有显著性。 结果:1正常肺组织、肺鳞癌、腺癌中p27k0,CyclinD,, PCNA蛋白的表达(见表 1) 1327kip蛋‘白在正常肺组织 (图1),鳞癌 (图2)、腺癌表 中 文 摘 要 达的阳性率分别为100%,48.3%,55.2%,p270，蛋白在正常 肺组织中的表达水平显著高于鳞癌组 (P0.01)和腺癌 (图 4)组 (P0.01),鳞癌组和腺癌组的表达水平比较无统计学 差异(P0.05)oCyclinD，在正常的肺组织无表达，在鳞癌(图 5)组、腺癌 (图6)组阳性表达率分别为67.7%,58.6%, 正常肺组织中CyclinD、表达显著低于鳞癌 (PD.01)和腺癌 (P0.01),CyclinD;在鳞癌和腺癌组表达比较，无显著性 差异 (P0.05)oPCNA在正常肺组织表达 13.3%，而在鳞 癌、腺癌阳性表达率分别为80.6%、72.4%，后两者比较无 统计学差异 (P0.05)，在正常肺组织与非小细胞癌 (NSCLC) 组织间的差异有显著性 (P0.01)。三者表达均与肺癌组织 类型均无关 (P0.05). 2p27‘,CyclinD,,PCNA蛋白表达与组织学分级的关系(见 表2) p27nl蛋白阳性表达率在高 (图8)、中、低分化