3,4-二氨基苯基苯甲酮在基质辅助激光解析离子化质谱分析磷脂中的应用.pdf

HUAXUE) 第5期 第39卷 分析化学(FENXI 研究报告 ChineseJournalof 605610 2011年5月 AnalyticalChemistry 3，4一二氨基苯基苯甲酮在基质辅助激光解析 离子化质谱分析磷脂中的应用 苗楠1 张宇1 张建业1’2 邹汉法¨ (中国科学院大连化学物理研究所，大连116023)2(郑州大学化学系，郑州450052) 摘要 考察了3，4氨基苯基苯甲酮(DABP)作为基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDl一TOF- 脂，可以有效抑制碱金属离子加成现象，得到单一的质子加成峰。样品信号强。所需激光能量低。卵磷脂(PC) 的检出限可达到500fmol。在实际样品鸡蛋和大豆提取物分析过程中，DABP基质对磷脂分子具有良好的分 辨率，碎片峰少。谱网背景干净，样品制备方法简单省时。 关键词 基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱；基质#3，4-二氨基苯基苯甲酮；磷脂 ’1 引 言 脂类和磷脂分子，是除蛋白、核酸、多糖外的极其重要的生物大分子【11。它们不仅构成了生物膜，还 是细胞的脂类第二信使分子。脂类组学(Lipidomics)是近年来新提出的组学概念。可以定义为“确定细 胞中的全部脂类种类以及所有脂类在脂类代谢、细胞信号转导、转录和翻译过程、基因调控中的生物学 作用”121。采用高灵敏和高通量的技术手段，主要是质谱技术。检测脂类在生命过程中的系统变化，研究 这些变化在信号转导、调控、代谢等各种生命过程中的作用和规律。 基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDI—TOF—MS)具有分析简便迅速、样品要求低、高灵敏 度、高可重复性及抗杂质干扰能力强等优点，广泛应用于蛋白、多肽以及核酸的分析中¨J，但在脂类分析 领域中应用较少。有证据表明，MALDI技术是脂类组学中分析脂类的有用工具，尤其是分析生物组织 或细胞提取物的脂类组成㈨1。尽管MALDI技术发展日益成熟，但对于实际样品的分析，合适基质的选 择仍基于经验的积累。DHB和CHCA在蛋白和多肽的分析上已经被证明是较好的MALDI基质，且 DHB也被应用于脂类分析中[61。此外，文献【7，8】以新的化合物为MALDI基质。分析脂类。离子液体型 MALDI基质也被应用于脂类分析，与传统固体基质DHB相比，可以提高样品点的均匀性、信号强度及 重现性【9】。 与MALDl分析肽段时相比，分析脂类时碱金属离子加成现象十分严重，影响脂类分子的定性和定 量分析。另外，不同结构的脂类分子存在质量重叠，影响结构鉴定n01。为了解决这些问题，常用薄层色 种既含有氨基又含有羰基的化合物，它在MALDI—TOF—MS分析中成功用于蛋白、多肽以及核酸的分 析【”叫s1。本研究以DABP为基质，用于磷脂的MALDI质谱分析，系统考察了其分析磷脂的能力。结果 表明，本方法不仅能降低碱金属离子的加成，而且还能提高离子信号强度。增强样品解吸离子化能力。 DABP作为MALDI基质分析磷脂具有可行性和良好的应用前景。 201ff08-16收稿；2010-12—07接受 本文系国家fj然科学基金(No．2067508i)资助 ‘E‘mail：halafazou@dicp．们．cn 万方数据 606 分析化学 第39卷 2 实验部分 2．1仪器与试剂 Organics公司)； 司)；大豆磷脂软胶囊(山东鸿洋神海洋生物技术有限公司)；甲醇(色谱纯，山东禹王实业有限公司)， HCI(优级纯，12mol／I。，天津科密欧化学试剂有限公司)，其它试剂均为分析纯。二次去离子水经过 Mill—Q水纯化系统处理。鸡蛋购于当地市场。 2．2 实验方法 将磷脂标准品(PC，PA和PS)溶在氯仿一甲醇(50：50