作为基因载体的低分子量壳聚糖的制备及研究进展.pdfVIP

2009，VoI．26No．10亿亏岛生物Z程 作为基因载体的低分子量壳聚糖的制备及研究进展 罗 霄。姚 晓 (南京工业大学材料科学与工程学院，江苏南京210009) 摘 要：低分子量壳聚糖作为非病毒性基因治疗载体有着广阔的前景，已成为研究的热点。综述了低分子量壳聚糖 的制备方法以及栽基因的研究进展，并讨论了影响转染的因素。 关键词：低分子量壳聚糖；制备；基因载体；基因转染 636．1 539 中图分类号：o Q 文献标识码：A 文章编号：1672—5425(2009)10—0018—04 壳聚糖是一种天然阳离子多糖，具有良好的生物 重，故不适于工业化生产。但在基因载体领域，国外研 相容性和生物降解性，无细胞毒性，可与带负电荷的高 究者多采用酸降解法阳~4]。 聚物如DNA、抗原以及大多数蛋白质药物相互作用， 目前在酸性溶液中进行降解的主要方法有：酸一 已广泛用作药物载体和医用辅助材料。高分子量壳聚 亚硝酸盐法、硝酸法、盐酸法、乙酸法、过乙酸法、氢氟 糖的大分子链结构中含有大量的一NH：和一OH基酸法、磷酸法、硫酸法等。 kDa、40 kDa 团，分子内氢键作用强烈，使其难溶于水，从而限制了 Marc等[23用硝酸法制得80 kDa、10 其应用，因此改善水溶性有助于拓展壳聚糖的应用领 域。当壳聚糖降解后，平均分子量降低，链长度缩短， 硝酸降解壳聚糖，发现硝酸进攻氨基，而不进攻乙酰 壳聚糖分子内的氢键作用减弱，分子构象发生变化，壳 基，降解过程中发生断裂的是p糖苷键，所以壳聚糖的 聚糖在水溶液中的无序程度增加，综合作用的结果使 得壳聚糖的水溶性大为改善[1]。将高分子量的壳聚糖 等[4]采用乙酸一亚硝酸钠法制备7～102kDa的低分 解聚成合适的低分子量壳聚糖，选择经济、快速、粒径 子量壳聚糖，发现低聚物的分子量随亚硝酸钠浓度的 可控性的制备方法正受到研究者的青睐。作者在此综 增加而减小，但脱乙酰度没有变化。稳定的脱乙酰度 述了低分子量壳聚糖的制备方法及载基因的研究进 有利于制备高电荷密度的低聚物，保持低聚物压缩质 展，并讨论了影响转染的因素。 粒的能力。 1．1．2氧化降解法 ， 1壳聚糖的降解方法 目前，国内外学者提出了许多壳聚糖降解方法，归 纳起来大致分为化学法、物理法和生物法三类。 法r73、高价溴化物法、0。等，其中H：O：氧化降解法最 1．1 化学法 为常用。 化学法是利用化学反应使壳聚糖分子结构中的糖 H：O：氧化降解法降解壳聚糖是目前研究较多的 苷键发生断裂，从而使壳聚糖的分子量降低。常见的 方法，其优点是成本低、易处理、对反应产物的后处理 有酸降解法和氧化降解法。 影响小、无残毒、易于实现工业化，缺点是反应过程中 1．1．1 酸降解法 壳聚糖的粘度和脱乙酰度都会发生变化。其氧化降解 壳聚糖在酸性溶液中会发生水解，即糖苷键的断 机理是在Hzoz对壳聚糖的降解过程中，H：0：分解 裂，酸在其中起催化作用。酸水解法虽然工艺简单，但 所形成的活性自由基可能夺取壳聚糖的伊1，4一糖苷键 是产量较低且产物分子量分布较难控制。并且产生大 的1位或4位上的H原子，然后C—O—C键发生断 量口葡糖胺，使得分离过程非常复杂，对环境污染严 裂： 收稿日期：2009—03—0