中心复合法优化Blakeslea+trispora产番茄红素的发酵条件.pdf

中心复合法优化Blakesleatrispora产番茄红素的发酵条件 万红贵，王金华，徐传学 (南京工业大学制药与生命科学学院，江苏南京，210009) 搐 要 用中心复合法对Blakeslea 设计试验，对影响番茄红素产量的8个相关因素进行了评估并筛选出具有显著效应的2个因素：装液量和接种 量。再采用中心复合法确定出最佳装液量和最佳接种量，分别为53．99mL和9．279％。优化后，发酵培养基中 3 番茄红素含量达到0．762g／L，比初始番茄红素产量提高了30．31％。 关键词 三孢布拉零，番茄红素，Plackett-Burman，中心复合法，优化 番茄红素是一种重要的类胡萝卜素。它具有11 个碳碳共轭双键‘1~31，正因如此，它拥有强有力的消 S04’0．2；VB’，0．003。 除自由基能力和较高的抗氧化能力[4,53。在防癌、防 发酵液培养基(g／L)：大豆粉，20．0；玉米粉， 心血管疾病、抗老化及美容方面拥有卓越的功 30．0；葡萄糖，30．0；玉米油，30．0；尿素，2．0； 效‘6’7|，被誉为“21世纪保健品市场的新宠”。目前， 番茄红素的研究越来越受到各界人士的重视，其在药 0．003。 品、保健品、食品、化妆品等行业中的应用，已成为当 I．3主要仪器设备 今国际上研究开发的一大热点，具有广阔的市场前 景‘8。。 国内外市场上销售的番茄红素主要来自番茄提 BSOL立式压力蒸汽灭菌器(上海华线医用核子仪器 取物，采用发酵法合成番茄红素尚未实现工业化生 振荡器、752s紫外可见分光光度计(上海棱光技术有 产‘引。2007年，徐军伟等m3报道，采用Blakeslea 限公司)。 trispora发酵合成番茄红素产量达0．5499／L，但从 成本考虑，离工业化生产还有一定的距离。 1．4培养方法‘11] 本文采用中心复合法系统地优化了Blakeslea三孢布拉氏霉正负菌在斜面上26℃单独培养48 h，分别接人种子培养基(50mL培养基／500mL三角 trispora霉菌的发酵条件，为番茄红素的规模化生产 奠定技术基础。 瓶)，26℃、200r／min旋转摇床培养48h，再正负菌 混合接种于500mL装有发酵培养基的三角瓶中培 1 材料与方法 养。 1．5分析方法 1．1菌株 1．5．1pH测定 三孢布拉氏霉菌(Blakesleatrispora)，正菌 (+)，负菌(一)，由南京工业大学国家生化工程技术 用pHS-3C型精密pH计测定。 1．5．2番茄红素含量的测定‘12] 研究中心发酵代谢工程实验室提供。 精确称取一定量的发酵液，于振荡器中振荡以破 1．2培养基 碎细胞，用石油醚、丙酮混合溶剂萃取番茄红素，测定 斜面培养基(g／L)：玉米粉，30．0；麦芽汁，12．0； 502 nm处的吸光值，计算番茄红素含量。 琼脂，14．0。 2结果与讨论 种子液培养基(g／L)：大豆粉，20．0；玉米粉， 2．