梵净山冷杉的保护遗传学及研究.pdfVIP

梵净山冷杉的保护遗传学研究 姓名：张广荣 年级：2005 导师姓名：唐绍清 教授（博士） 专业：生物化学与分子生物学 研究方向：植物分子系统学 中文摘要 梵净山冷杉（Abies fanjingshanensis W.L.Huang.Y.L.Tu et S.Z.Fang ）分布于贵州梵净山顶 部白云寺、烂茶顶及锯齿山一带，1981 年由黄威廉首次在贵州梵净山发现并命名。梵净山冷 杉是松科冷杉属植物，被列入《中国植物红皮书》中，为国家一级保护植物。在1998 年IUCN 拟定的“针叶树行动计划”中，将其列为全球重点保护的针叶树种。作为第四纪冰川残留的 孑遗植物，梵净山冷杉的发现对植物区系学、植物群落学、植物地理学、古生物学、古气候 学及冰川学等学科有一定的科学意义。 本研究利用 SSR 及 cpSSR 两种分子标记方法，对采集的 130 份梵净山冷杉成年植株及 21 份幼苗样品进行遗传多样性及瓶颈效应分析，为有效保护梵净山冷杉提供理论参考。本研 究获得以下结果： 1.SSR 分子标记方法揭示梵净山冷杉遗传多样性水平：平均等位基因观察数Na 为3.5 （成 年植株）、3.375 （幼苗），平均有效等位基因树Ne 为2.5594 （成年植株）、2.2944 （幼苗）， 观察杂合度Ho 为0.4904 （成年植株）、0.4107 （幼苗），期望杂合度He 为0.5505 （成年植 株）、0.5078 （幼苗）。SSR 方法揭示梵净山冷杉成年植株的遗传多样性比幼苗高，并且期 望杂合度均高于观察杂合度。 2.根据7 个SSR 多态性位点的等位基因频率分别估计梵净山冷杉成年及幼苗的内繁系数 Fis 。其中，成年植株Fis 平均值为0.113 ，变化范围从-0.064 到0.278;幼苗Fis 平均值为0.215 ， 变化范围从-0.077 到0.459 。无论是成年植株还是幼苗，Fis 均大于0 ，说明梵净山冷杉居群很 可能发生自交现象，同时幼苗的Fis 值明显大于成年植株。 3. cpSSR 方法产生的 6 个多态性片段在全部梵净山冷杉个体中共产生 8 种不同的单倍 型。有效单倍型数目Ne 为4.6148 ，单倍型杂合度He 为0.7886 。各种单倍型出现的频率相差 比较大，其中B 型单倍型占所有类型的41.05% ，而C、E、H 型单倍型分别占了6.62%、1.32% 和0.66% ，说明C、E、H 型单倍型在梵净山冷杉中很稀缺。 4. 基于双相突变模型（TPM ，Two-phase Mutation Model ）对梵净山冷杉成年植株的杂 合度过量检验表明，期望杂合度He 均显著大于平均杂合度Heq(P 值为0.052~0.294 ）。杂合 度过量的WILCOXON 单尾检验（P=0.00391 ）显示梵净山冷杉经历比较严重的遗传瓶颈。等 I I 位基因频率模式移动检验表明，梵净山冷杉居群的等位基因频率分布偏离正常的L 型，说明 梵净山冷杉在过去曾经经历了比较严重的瓶颈效应。 根据本研究的结果：梵净山冷杉居群经历了遗传上的瓶颈效应，并且居群内的自交现象 比较严重，遗传多样性较低。因此，建议应该大力保护好梵净山冷杉周围的生境及现有的每 一个冷杉个体，同时加强梵净山冷杉生存繁衍的研究。 关键词：梵净山冷杉，遗传多样性，瓶颈效应，SSR，cpSSR II II Study on Conservation Genetics of Abies fanjingshanensis Master Candidate: Guangrong Zhang Grade: 2005 Supervisor: Pro. Shaoqing Tang Spe