乳酸杆菌对5-Fu腹腔注射致肠屏障功能障碍的保护作用.pdf

乳酸杆菌对5．Fu腹腔注射致肠屏障功能障碍的保护作用 硕士生姓名： 贾 翼 指导教师： 杨兴无教授 专业名称： 外科学 摘 要 目的： 1 观察5．Fu腹腔注射对SD大鼠小肠结构及肠屏障功能的影响，比较一次性给药 和分次连续给药方案对小肠粘膜的损伤作用； 2探讨乳酸杆菌对5．Fu引起的大鼠肠屏障功能损伤的保护作用及机制。 方法： 乳酸杆菌组(F)。B组、C组每天腹腔注射5-FuD1-5天，A组注射等比例 50mg／kg A组、B组等容积生理盐水灌胃。E组、F组腹腔注射5．Fu D1天，D组 250mg／kg 注射等容积生理盐水；F组每天予乳酸杆菌溶解液lml灌胃(含乳酸杆菌1×109trig m1)D1．7天，D组、E组等容积生理盐水灌胃。实验中观察动物体重变化并对腹泻 情况进行评分。于实验第8天处死每组动物，活体取小肠组织观察肠粘膜病理学 变化和超微结构，腹主动脉取血测定血浆内毒素，采用免疫组化方法测定小肠粘 膜NF．1(B表达，BCA法测定小肠黏膜蛋白质含量。 结果： l 各实验组大鼠体重变化 实验过程中对照组A对照组D体重进行性增加，增加量差别无统计学意义。 B组、C组及E组各有一只大鼠与实验中死亡。实验后第8天B组、C组、E组、 F组体重明显下降，与对照组有显著性差异P0．05。组f日J比较，F组体重下降小于 另外三组，差异有统计学意义P0．05。 2 各实验组大鼠腹泻情况 实验72小时，E组腹泻程度最严重，C组好于B组，F组好于E组，B组好 于E组，差异有统计学意义，P0．01；F组C组之间无差别。实验第8天，B组腹 1 泻程度最严重，C组好于B组，F组好于E组，E组好于B组，F组好于C组， 差异有统计学意义，P0．01。 3 血浆内毒素水平测定 实验第8天，两对照组I’日J内毒素比较，D组、A组差异无统计学意义；B、C 与E、F组血浆内毒素均明显升高，其中B组C组，E组F组，各组间比较差异 有显著统计学意义(P0．01)；d,N量5．Fu连续注射组血浆内毒素水平均高于大剂量 5一Fu一次性注射组，两组间比较差异有显著统计学意义(PO．01)；未予乳酸杆菌灌 胃组血浆内毒素水平均高于乳酸杆菌灌胃组，两组间比较差异有统计学意义(P O．01)。 4 各实验组大鼠病理评分 实验第8天，B组病理评分最差，C组好于B组，F组好于E组，E组好于B 组，F组好于C组，差异有统计学意义，P0．01。 5 小肠黏膜超微结构观察 实验第8天，对照组超微结构正常。B组、C组、E组、F组有不同程度超微 结构改变。体现在小肠细胞微绒毛、细胞间紧密连接及细胞间隙的改变。F组好于 E组，两组好于C组。B组变化最重。 6 各实验组大鼠肠黏膜NF．r,B表达情况 实验第8天，B、C与E、F组NF．KB的表达及含量均高于A、D组，其中E 组高于F组，B组高于E组，C组高于F组，差异有统计学意义，P0．05；B组高 于C组，但差异没有统计学意义，P0．05。 7 小肠黏膜蛋白质含量 实验第8天，A组的肠黏膜蛋白质含量D组，但差异无统计学意义：B、C 与E、F组均低于A、D组：C组B组，F组E组，除F组外，其余3组与各自 对照组比较差异有统计学意义，P0．05；F组与D组比较，差异无统计学意义；B、 P0．01。 C组均低于于E、F组，P0．05；B、E组均低于于C、F组， 结论： l 通过腹腔注射5．Fu造成大鼠肠黏膜屏障功能受损，这一过程与NF-rd3被 激活产生炎症反应，细胞间紧密连接完整性破坏，肠黏膜蛋白质丢失，结果造成 内毒素血症有关。 2比起大剂量给药的瞬间激活，肠黏膜上皮细胞中NF．rd3被d,N量5一Fu给 药持续激活所表达的炎症反应更为严重。可能持续激活在体内起到扩增炎症的作 用。 3乳酸杆菌对大鼠5．Fu腹腔注射引起的肠黏膜屏障功能受损有一定的防治 作用。