缺血后处理和缺血预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用对比及研究.pdf

中文摘要 缺血后处理与缺血预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损 伤保护作用的对比研究 摘 要 目的：通过动物实验，观察缺血后处理(ischemic 缺点，探讨缺血后处理对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用， 为临床上减轻肝脏缺血再灌注损伤提供更加有效的措施。 组，每组8只，即假手术组(sham 组：麻醉后开腹，仅游离肝周韧带；(2)IR组：麻醉后游离 肝周韧带，夹闭供应肝左叶，肝中叶和尾状叶的血管，造成 70％的肝脏缺血，但不阻断供应肝右叶的血管，防止门静脉 和胃肠道淤血，缺血60分钟，再灌注120分钟；(3)IP组： 处理方法同前，缺血5分钟，再灌注5分钟，然后缺血60 60分钟，再灌注2分钟，缺血2分钟，再灌注3分钟，缺 血2分钟，再灌注5分钟，缺血2分钟，再灌注7分钟，缺 血2分钟，恢复灌注95分钟。各组大鼠处理完后，经心脏 采血检测血清谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转 4％戊二醛中，待做透射电镜检查。另取肝组织用4％中性多 中文摘要 聚甲醛及时固定，待做石蜡切片后行组织学检查。取肝组织 约19左右，制成10％的肝组织匀浆，于．70℃的冰箱中保存。 比较各组肝组织HE染色切片；免疫组化法检测NF．rBp65 index，PI)；脱氧核苷 表达水平并计算阳性细胞指数(positive 酸末端转移酶介导的缺口末端标记法 transferasemediatedd-UTPnick (terminal—deoxynucleotidyl end (apoptosisindex，AI)。用比色法检测肝组织中SOD的活性。 多组间均数差异性比较用单因素方差分析(one．way 计软件进行分析，以P0．05为差异有统计学意义。 结果：(1)S0组大鼠肝脏表面色泽光亮红润；IR组、IP 组、I-post组在阻断肝血流后，肝脏颜色变成暗红色，质地 变软。再灌注2h后，IR组肝脏膈面颜色较前变浅，脏面的 晰，肝细胞索完整，肝实质细胞结构正常、无水肿，肝血窦 无明显淤血，中性粒细胞散在，以汇管区为甚；IR组肝小 叶中央静脉和肝血窦淤血明显，肝血窦狭窄，肝细胞可见不 同程度的浊肿变性和空泡状变性，偶可见点状坏死，肝组织 中有中性粒细胞的聚集、浸润，以中央静脉周围为甚；IP 组和I-post组肝脏淤血较IR组减轻，肝小叶结构基本正常， 细胞变性不明显，中性粒细胞浸润减轻。(3)电镜结果：IR 组在X4k镜下可见大部分双层核膜融合，模糊不清，部分 核周隙缺失，细胞周围有一处椭圆形水肿块；在×20k镜下 可见肝细胞线粒体绝大部分嵴，大部分膜模糊不清或融合， 中文摘要 粗面内质网轻度扩张，脱颗粒明显。IP组在×4k镜下可见 肝细胞内一椭圆形、电子密度较高脂滴，大部分双层核膜融 合，模糊不清，部分核周隙缺失或消失，在×20k镜下可见 肝细胞线粒体部分或大部分嵴、部分膜融合、模糊不清或缺 失，粗面内质网有脱颗粒现象。I-post组在×5k镜下可见肝 细胞内一椭圆形、电子密度较高脂滴，大部分双层核膜融合， 模糊不清，部分核周隙缺失或消失，细胞核有3．4个核仁， 在×20k镜下可见肝细胞线粒体部分或大部分嵴、部分膜融 合、模糊不清或缺失，粗面内质网有脱颗粒现象。(4)SO组、 17．88U／L、1312．83±96．95U／L、730．67±198．80U／L、753．67 ±105．73 1013．83±210．5lU／L、 643．17±133．77U／L、725．33± 中文摘要 NU／mg、8．53±1．28NU／mg、10．64±2．35NU／mg、9．62-+-2．86 计学意义(PO．05)。 结论：(1)缺血后处理可以有效减少的NF．KB表达，增 加SOD的活性，降低肝细胞的凋亡，进而减轻肝脏缺血再 灌注损伤。(2)缺血预处理可以有效减少的NF．rB表达，增 加SOD的活性，降低肝细胞的凋亡，进而减轻肝脏缺血再 灌注损伤。(3)对于肝脏缺血再灌注损伤，缺血预处理与缺 血后处理在降低的NF．v,B表达、提高SOD的