乌司他丁对兔移植供体肺的保护作用有效性和机制及研究.pdf

乌司他丁对兔移植供体肺保护作用的有效性和机制研究 乌司他丁对兔移植供体肺保护作用的 有效性和机制研究 专业：微创胸心外科 学位申请人：张健 导师：谷力加教授 摘要 背景如何有效的延长移植供体肺的安全保存时限一直是肺移植的研究热 点之一。目前肺移植术后早期肺功能障碍的发生率仍在20％左右，这主要是由于 供体肺保护方面的问题引起的。虽然供体肺的保护方法很多，肺安全保存时间也 逐渐延长，但是目前肺保存的安全时限仍仅为5—6小时，相对于其他移植供体 器官，肺保存安全时限比较短。这限制了供体肺的长距离运输，在很大程度上阻 碍了肺移植的临床应用。供体肺保存的最终目的就是要有效的减少保存期的缺血 损伤和移植后的缺血一再灌注损伤(ischemia—reperfusioninjury，IRI)，尽可 能的延长供肺的保存时间，最大程度的恢复移植术后的肺功能和减少移植术后并 发症。为了达到这个目的，很多学者进行了大量针对供体肺缺血和缺血一再灌注 损伤中不同细胞损伤机制的研究。在供肺缺氧期间肺泡巨噬细胞和肺泡II型细胞 necrosis factor，TNF)等细胞因子参与肺炎症反应：同时白细胞与血管内皮粘附并释放大 量缩血管物质和炎症趋化介质引起肺血管收缩、血小板聚集、血栓形成、肺组织 水肿；在缺血后再灌注期，内皮细胞和白细胞表面的粘附分子表达增加，白细胞 与内皮细胞黏附，并且进一步游出血管壁浸润组织，白细胞通过产生超氧阴离子、 脱颗粒释放弹力蛋白酶(elastase)和金属蛋白酶(matrix 删P)等损伤肺内皮细胞和肺实质，并且聚集于毛细血管中而形成栓塞。 乌司他丁对兔移植供体肺保护作用的有效性和机制研究 酶抑制剂，对胰蛋白酶、弹性蛋白酶、磷脂酶等多种蛋白酶有明确有效的抑制作 用，临床中广泛应用在术后减轻机体全身炎症反应和脏器功能保护等方面。很多 基础实验研究和临床研究表明，乌司他丁对减轻全身炎症反应、术后脏器功能恢 复、抑制炎症细胞激活和减少炎症介质释放、减轻缺血一再灌注损伤等有明确的 效果。有研究表明，乌司他丁对在体兔肺缺血再灌注损伤有明显的保护作用，它 DJ等的临床研究表 可以针对肺缺血再灌注损伤中多个不同的环节的起效。Wang GA等报导乌司 明，在体外循环术后应用乌司他丁可以改善患者肺功能；Wanner 他丁对离体肝、小肠等组织器官的缺血再灌注损伤也有明显保护作用。乌司他丁 可以通过抑制转录因子激活从而减少TNF—n的合成和释放，并进一步降低TNF— a介导的细胞膜表面粘附分子的上调，其结果是阻止了白细胞和血管内皮的粘 附，减少了血管内白细胞的淤积，白细胞炎症介质(IL一6、IL一8等)的释放和弹 力蛋白酶(elastase)和金属蛋白酶(matrix 的释放。但乌司他丁是否能有效的保护供体肺，减少供肺的缺血和缺血一再灌注 损伤?它能否有效的延长供体肺保存时间?何种剂量和使用方法才能发挥其最 佳的保护作用，它能应用在临床移植供体肺保存中吗?基于以上问题，本实验拟 建立兔供体肺保存和温血再灌注动物模型，并在供体肺灌洗和保存中应用乌司他 丁，研究在远超过安全保存时限后供体肺的功能和病理改变，用以评价乌司他丁 对供体肺的保护效果，并为进一步临床应用乌司他丁进行供体肺保存提供理论依 据。 目的1建立兔供体肺保存和温血再灌注模型；2利用该模型研究乌司他 丁对兔供体肺缺血保存和温血再灌注损伤的保护效果。 方法 1实验分组：选取成年新西兰大白兔16只，雌雄不限。实验采用完全随机 对照设计，分标准对照组和乌司他丁组，将实验动物先编号，然后随机入组。 A标准对照组：n=8，体重：2．34±0．16Kg，肺动脉灌洗液和保存液为 Euro—collins B乌司他丁组：n=8，体重：2．38±0．25Kg，肺动脉灌洗液和保存液为 E