2012高考生物二轮复习 专题九 现代生物科技精品课件.pptVIP

* 专题九　现代生物科技 第一讲　基因工程与克隆技术 核心要点突破 一、DNA重组技术的基本工具 质粒、噬菌体、动植物病毒 E·coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 EcoRI限制酶 Sma I限制酶 常用 类型 (1)能在宿主细胞内稳定存在并大量复制 (2)有多个限制酶切割位点 (3)具有特殊的标记基因 (1)E·coli DNA连接酶只连接黏性末端 (2)T4DNA连接酶连接黏性末端和平末端 (1)识别特定的核苷酸序列 (2)在特定位点上切割 作用 特点 (条件) 两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键 作用 部位 携带目的基因进入受体细胞 连接DNA片段，形成重组DNA 切割目的基因和运载体 作用 运载体 DNA连接酶 限制酶 二、基因工程的基本操作程序 1．基因工程的基本操作程序分析 (1)目的基因的获取途径 ①可以从自然界中已有的物种中分离出来，如可从基因组文库或cDNA文库中获取。 ②人工合成目的基因(化学方法合成或逆转录) ③利用PCR技术扩增目的基因。通过PCR技术对已获取的目的基因进行扩增，可获取大量目的基因。 (2)基因表达载体的构建 ①基因表达载体的组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因。 ②基因表达载体的构建方法 (3)将目的基因导入受体细胞 原核细胞 受精卵 受精卵 体细胞(需经组织培养) 受体细胞 感受态细胞法(用Ca2＋处理) 显微注射技术 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 常用方法 微生物细胞 动物细胞 植物细胞 (4)目的基因的检测与鉴定 ①导入检测：DNA分子杂交技术，即使用放射性同位素标记的含目的基因的DNA片段作探针检测。 ③个体生物学水平鉴定：转基因生物是否具有抗性或转基因产品的功能活性。(根据目的基因表达出的性状判断)。 2．实验：DNA的粗提取与鉴定 DNA的粗提取与鉴定 三、基因工程的应用 ①抗虫但不抗病毒、细菌、真菌等 ②培育抗虫作物优点：减少环境污染、降低生产成本 ③不同抗虫基因作用机理不同 ④Bt毒蛋白基因来自苏云金芽孢杆菌 棉花、水稻等 抗虫：Bt毒蛋白水解成多肽与肠上皮细胞结合，形成穿孔，细胞肿胀裂解致死；两种抑制剂分别抑制相应酶活性，影响消化；植物凝集素为糖蛋白，与肠黏膜结合，影响营养物质的吸收和利用 抗虫基因、Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因 抗虫转基因植物 植物基因 工程 常用方法： ①农杆菌 转化法； ②基因枪 法； ③花粉管 通道法 备注 受体生物 作用 目的基因 抗逆指抵抗不良环境的能力，如盐碱、干旱、低温、涝害等 烟草(抗旱、抗盐碱)、番茄(抗寒)、大豆、玉米(抗除草剂) ①通过改变细胞内渗透压，提高抗盐碱抗旱能力； ②耐寒能力提高； ③抗除草剂 ①调节细胞渗透压基因； ②抗冻蛋白基因(从鱼体内获取)； ③抗除草剂基因 抗逆转基因植物 引起植物生病的微生物有病毒、细菌、真菌三大类 烟草(抗病毒)、小麦(抗病毒) 前两种为抗病毒作用；后两种为抗真菌作用 病毒外壳蛋白基因、病毒复制酶基因、几丁质酶基因、抗毒素合成基因 抗病转基因植物 赖氨酸、亮氨酸等都属于必需氨基酸 ? 玉米、番茄、牵牛花等 ①控制合成的蛋白质含必需氨基酸多； ②延迟番茄成熟； ③改变花瓣的颜色 ①含必需氨基酸的蛋白质编码基因； ②控制番茄果实成熟的基因； ③花青素代谢有关的基因 转基因改良植物的品质 选择猪的器官做人器官替代品的原因： ①其内脏构造、大小、血管分布与人相似； ②体内隐藏的致病基因少 猪 ①抑制抗原决定基因的表达； ②不能合成相应抗原 ①某种调节因子； ②设法除去抗原决定基因 转基因动物作器官移植的供体 部分人对乳糖会发生过敏反应 奶牛 分泌乳汁来生产相应的药品 药用蛋白乳腺基因＋微生物蛋白基因＋启动子 转基因动物生产药物(生物反应器或乳房生物反应器) 不能导入生长素基因 鲤鱼 促进生长，提高生长速度 生长激素基因 提高动物生长速度 动物细胞 工程方法： 显微注射 法 受体细胞： 一般用受 精卵 选择微生物作受体的原因：繁殖快、单细胞、遗传物质少 微生物，如大肠杆菌、酵母菌等 生产合成相应的药品，如胰岛素、干扰素、乙肝疫苗等 控制药品合成的相应基因，如人的胰岛素基因、干扰素基因、乙肝疫苗基因等 基因工程药品 微生物 细胞 工程方法： 转化法 受体细胞： 大肠杆菌 应用最 广泛 仅处于实验阶段，仍有许多问题和困难制约该技术的开展，所以该技术并未在临床开展 把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中，可分为体外基因治疗和体内基因治疗两种方法 基因治疗 临床应用阶段 制作相应探针，利用DNA分子杂交原理，快速、准确检测人类某种疾病 基因检测 基因检测和 基因治疗 　四、蛋白质工程及与基因工程的区别 1．蛋白质工程的流程 蛋白质工程是在基