HMGB1对人脐静脉血管内皮细胞表达E-选择素调控机制研究.pdfVIP

目 录 一、摘要 中文论著摘要……………………………………………………………………．．1 英文论著摘要…………………………………………．．．…………………………6 二、英文缩略语………………………………………………………………………12 三、论文 论文一人HMGBI基因干扰载体的构建和表达 前言………………………………………………………………………………13 材料与方法………………………………………………………………………13 实验结果…………………………………………………………………………20 讨论………………………………………………………………………………25 结论………………………………………………………………………………………………………”26 论文二HMGBl对人脐静脉血管内皮表达E-选择素的调控机制的研究 前言………………………………………………………………………………27 材料与方法………………………………………………………………………27 实验结果…………………………………………………………………………29 讨论………………………………………………………………………………32 结论………………………………………………………………………………………………………一34 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………35 五、参考文献…………………………………………………………………………36 六、附录． 综述…………………………………………………………………………………………39 在学期及科研成绩………………………………………………………………53 致谢………………………………………………………………………………54 个人简介…………………………………………………………………………55 ·中文论著摘要· HMGBl对人脐静脉血管内皮表达E．选择素调控机制 的研究 刖 舌 脓毒症指由感染引起的全身炎症反应综合征，其发生率以每年1．5％一8％递 增，病死率却无明显的改善。高迁移率蛋l(HMGBI)是高迁移率族蛋白超家族成 员之一，广泛存在于真核细胞核中最重要的非组蛋白，分子质量小，含量丰富，序列 高度保守。1999年HMGBl首次报道作为新的潜在的晚期炎症介质参与了脓毒症 的发病过程，是脓毒血症晚期的重要炎症介质。血管内皮细胞在脓毒症的发生发 展中具有重要的作用。它不仅是脓毒症时受损的靶细胞，同时还通过其广泛的生 物学功能主动地参与了器官功能的损伤。血管内皮细胞受到炎症刺激时可以释放 HMGBl，促进细胞因子和E～选择素黏附分子的表达。 E一选择蛋白(E—selectin)，又称内皮细胞．白细胞粘附分子．1 adhesion (endothelial．1eukocyte 选择蛋白家族。其表达具有严格的细胞特异性，仅发现其表达于血管内皮细胞及 经特殊处理的血管平滑肌细胞。内皮细胞激活时内皮细胞表面或血浆中粘附分子 表达的增加是各种类型的脓毒症的典型表现。血浆E．选择素的水平和脓毒症患者 的SAPSII和MOF评分呈正相关。血浆E一选择素的增加反应了内皮细胞膜表达蛋 白的增加，能直接反映内皮的激活或功能障碍。胞外HMGBl为一种重要的炎症 介质和致炎细胞因子，是启动和维持炎症瀑式反应的中心分子，与脓毒症等的发病 机理关系密切。HMGBl在细胞核内的与DNA广泛的、非特异的结合，可与一些 转录因子相互作用参与DNA复制、细胞增殖分化、基因转录等生命活动。Hox基 因属于同源盒基因(Homeobox gene)，是与生物体发育密切相关的重要基因调控家 族。核内的HMGBl可以与HOX转录因子相互作用增强了DNA的结合能力和转 录活性。有研究发现，HOXA9参与了内皮细胞的E一选择素转录调节日．HOXA9 下调是内皮细胞激活的必要条件。因此，我们推测核内HMGBl可能通过HOXA9 激活内皮细胞的作用进而调节E一选择素的表达。 本实验中，我们旨在构建短发夹的HMGBl基因的真核细胞表达载体，并将 重组质粒转染到内皮细胞中，观察其对HOXA9基因和E一选择素的表达影响，探 讨HMGBl基因表达对内皮细胞激活表达E一选择素转录调控可能的机制。