甘蓝型油菜线粒体功能未知基因+ORF+117的载体构建与转化.pdfVIP

氨基酸和生物资源 ， （）： 　 ２０ １ ５ ３ ７ ２ ４３ ～５ １ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄｓ ＆ Ｂｉｏｔｉｃ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ： ／ ＤＯＩ １ ０．１ ４１ ８８ ．ａ ｓｈ．２０ １ ５ ．０２ ．０ １ ０ ｊ ｊ 甘蓝型油菜线粒体功能未知基因ＯＲＦ １ １７ 的载体构建与转化 ， １ ２ ２ ２ １ １  范世航 ，郝万军 ，华 玮 ，陈永勤 ，杨之帆 　 （ 湖北大学生命科学学院，湖北武汉 ； 中国农业科学院油料作物研究所／农业部 １ ． ４３００６２ ２ ． 油料作物生物学与遗传育种重点实验室，湖北武汉 ４３００６２ ） 摘要：本研究克隆了甘蓝型油菜线粒体功能未知基因 ，构建了带有线粒体转运信号肽序列（ ）的植物过表达载 ＯＲＦ １ １ ７ ＴＰ 体 、 和 ，转化野生型拟南芥并进行抗除草剂筛选，共获得纯合的 ３ ５ Ｓ ∷ＴＰＯＲＦ１ １ ７ ３ ５ Ｓ ∷ＴＰＥＧＦＰ ３ ５ Ｓ ∷ＴＰＯＲＦ１ １ ７ＥＧＦＰ 转基因拟南芥株系 个。 表明， 在转基因材料中得到高效过表达。用转 、 ６２ ｑＰＣＲ ＯＲＦ １ １ ７ ３ ５ Ｓ ∷ＴＰＥＧＦＰ ３ ５ Ｓ ∷ＴＰ ＯＲＦ１ １ ７ＥＧＦＰ 拟南芥制备原生质体，经线粒体特异染料染色，在激光共聚焦显微镜下做线粒体、 共定位检测， 蛋白 ＧＦＰ ＧＦＰ 和ＯＲＦ１ １ ７ＥＧＦＰ 融合蛋白被准确定位到了线粒体。 关键词：甘蓝型油菜；线粒体；转运肽；载体构建 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） Ｑ ３ １ Ａ １ ００６８３ ７ ６ ２０ １ ５ ０２００４３０９ Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｅｘ ｒｅｓｓｉｏｎ Ｖｅｃｔｏｒ Ｃａｒｒ ｉｎ ａｎ ｐ ｙ ｇ （ ） （ ） Ｕｎｋｏｗｎ Ｇｅｎｅ ＯＲＦ １ １７ ｆｒｏｍ Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ Ｌ．