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离子色谱法测定乌拉胆碱 摘要：乌拉胆碱是一种季铵盐化合物，作为神经系统疾病用药，可注射或片剂口服。本文采用离子色谱方法代替传统的重量分析方法，简单方便重现性好。不但可以同时分析乌拉胆碱及其水解产物，且各项方法参数均优于现有指标，线性范围可达4个数量级，方法准确、可靠，适于推广。 关键词：离子色谱，乌拉胆碱，水解物，IonPacCS14分离柱 前言 胺类在不同的工业中广泛应用，如化学工业、制造业、电厂和制药工业。在制药工业中， 胺类能够用于乳化剂和药物生产。乌拉胆碱，2-[ 甲酰胺基 氧]-N,N,N-三甲基丙基氯化铵，是季铵盐化合物，在结构和药效性上与乙酰胆碱有关，可注射或片剂口服用于闭尿治疗。美国药典 USP 方法24 NF 19 第230页 最近建议，乌拉胆碱的重量分析方法可以用选择性更强的离子色谱分析方法代替[1]。这个方法用IonPacCS14分离柱分离，手动配制20 mM MSA为淋洗液，而后抑制型电导检测。本应用注解中MSA淋洗液由EG40电解在线产生，使得重现性非常好，而且方便，不同实验室之间容易重复。我们讨论了方法的检测限 MDLs 、测定过程中乌拉胆碱及其降解产物（2-羟基三甲基丙基氯化铵，2-HPTA）的潜在干扰。 实验部分 Dionex DX 600，包括：GP50梯度泵、ED50A电化学检测器、EG40淋洗液发生器、 EluGen.EGC-MSA罐、AS50自动进样器、AS50柱温箱带电导池Chromeleon.6.4 色谱工作站。 试剂和标准 17.8 MΩcm去离子水、六种阳离子混标溶液-II、氯化乌拉胆碱 U.S. Pharmacopeia 条件 分析柱：IonPac CS14阳离子交换柱，4 mm x 250 mm 保护柱：IonPac CG14阳离子交换柱，4 mm x 50 mm 柱温：30 °C 淋洗液：20 mM MSA，通过EG40产生 流速：1 mL/min 进样体积：25μ 检测器：抑制型电导检测，CAES.抑制器，抑制电流为67 mA 预计反压：~2100 psi 预计背景：~0.2 μS 运行时间：15 min 溶液和试剂的准备 试剂水 水的电阻率应在17.8 MΩcm以上，用前过0.2-μm膜。 淋洗液 向EG40（带EGC-MSA罐）泵入水，在线产生20 mM MSA淋洗液。Chromeleon软件能够追踪MSA的使用量并计算剩余的使用时间。当剩余的使用时间降至10%以下后，更换 EGC-MSA罐。也可以手动配制20 mM MSA淋洗液。取50 mL 0.4 N MSA浓林洗液，用去离子水稀释至1.0 L。超声脱气10min。将淋洗液保存在塑料容器中。或者称取96.10 g MSA固体 MSA, 99% ，用500mL去离子水溶解配制成1.0 N的存储溶液。取20 mL 1 N MSA浓林洗液，用去离子水稀释至1.0 L。超声脱气10min。将淋洗液保存在塑料容器中。 标准存储液 1000 mg/L 乌拉胆碱标准溶液 称取0.050 g乌拉胆碱固体，溶于50.0 g 去离子水，保存在塑料瓶中，超声溶解混匀。 1000 mg/L 2-HPTA标准溶液 称取0.050 g乌拉胆碱固体，溶于50.0 g 去离子水，保存在塑料瓶中。加入50 mL 0.1 N NaOH，超声溶解混匀。五天后乌拉胆碱会完全水解生成2-HPTA。 标准工作液 用去离子水将存储溶液稀释相应倍数，得到不同浓度的工作溶液：0.02, 0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1, 2, 5, 10, 25, 50, 100, 200, 500, and 1000 mg/L。2-HPTA的最高浓度为500 mg/L。 系统的准备和建立 CAES抑制器的水化：在“Eluent-In”和“Regen-In”口各注入3mL去离子水，约放置20mi后，抑制器可以完全水化。要了解CAES操作的更多信息，请参考Installation and Troubleshooting Instructions for the CAES Document No. 031770-02 。 安装EG40，连接入网络，用Chromeleon色谱数据系统进行配置。参考EG40操作手册调节EluGen MSA罐，以1.0 mL/min流速运行梯度，前20 min将MSA的浓度从1改变到60 mN，然后以60 mN 运行40 min。在EluGen罐调节期间，去掉安装的0.005 in. PEEK反压管。安装4 × 50 mm IonPac CG14保护柱和4 × 250 mm IonPac CS14分析柱。确保系统反压大于2000 psi （20 mM MSA，1.0 mL