糖蛋白胆红素钙水溶性复合物的形成及光谱研究.pdfVIP

维普资讯 第 4期 无 机 化 学 学 报 V01．19．NO．4 2003年 4月 CHINESEJOURNAL OFIN0RGANIC CHEMIsTRY Apr．，2003 糖蛋 白／胆红素钙水溶性复合物的形成及光谱研究 谢安建 1,2 沈玉华 ，1,2 董 婷 ·夏 兵 1,2 黄方志 t，z 安徽大学化学4~Y．-学院，合肥 230039 南京大学配位化学国家重点实验室，南京 210093 采用傅立叶变换红外光谱 FT．IR ，结合减法 、二阶导、退卷积和 曲线拟合等先进光谱技术，紫外可见光谱，icP．AES分析 方法，对不 同质量 比的 a．酸性糖蛋 白 AGP 和胆红素钙 CaBR 反应后 的滤液进行 了研究。结果表 明，AGP和 CaBR之 间存在 着较强的相互作用，导致 AGP二级结构 的有序性增加，CaBR的水溶性增大，两者形成 了可溶性 的AGP／CaBR复合物 。 关键词 糖蛋 白 胆红素钙 复合物 光谱 胆结石 分类号 06l4，23’l O657，3l 胆红素钙是色素型胆结石 的主要成分。而单纯 1 实验部分 的胆色素钙盐 的沉积并不能形成胆结石 。正是 由于 1．1 试 剂 有少量糖蛋 白、多糖等有机基质 的参与，导致该类胆 胆红素 、糖蛋 白均为 Sigma公司产品；无水氯化 结石 的结构复杂，至今没有可 以有效治疗其 的溶 钙 、氯化钠均为分析纯；硝酸，优级纯，上海前进化学 石剂和复方剂…。因此，多年来 。关于色素型胆结石 试剂厂产品。 的形成机 理 、预 防和抑制一 直是人们研 究 的焦 1．2 仪 器 点 ’ 。 Nicolet公司 的Nexus870傅立 叶变换红外光谱 对于糖蛋 白在结石形成 中的作用 ，多数人认 仪，扫描范围4000—400cm～，扫描 32次。分辨率 为 叫糖蛋 白是成石 因子 ，诱导 和促进结石 的形 4cm ；北京普析通用仪器有限责任公司的TU．1901 成 。但最近 的研究表 明，不 同相对分子质量 、不 同结 双光束紫外可见分光光度计；美 国LeemansLab电 构 的糖蛋 白对结石的形成所起 的作用不 同… 引，某 感耦合等离子体原子发射光谱仪 。 些可以起促成核作用，另一些则具有抑成核作用 。 1．3 实验方法 因此研究糖 蛋 白与胆红素钙之 间的相互作用，对 于 1．3．1 CaBR的合成 理解色素型胆结石的成 因，预防和治疗该类胆结石 加 人 0．2692g胆 红 素 于 810．00mL氯 仿 中 、 具有重要意义 。本文将不 同质量 比的AGP与 CaBR 0．1077g无水氯化钙于 300．00mL无水 乙醇 中，搅拌 在生理盐水中混合、反应，并采用多种先进光谱技 使其充分溶解 。然后边搅拌边将氯化钙溶液缓慢滴 术，对反应后 的滤液进行 了表征 。试 图从 AGP与 人到胆红素溶液 中，再加人一定量的吡啶，搅拌 1h CaBR之 间的相互作用 以及生 物矿化 的角度讨论 后静置 。出现红棕色沉淀，离心分离，并依次用无水 AGP对 CaBR成核 、生长 的影 响，以期探讨色素型胆 乙醇 、二次水 、氯仿洗涤，真空干燥 12h，所得产物为 结石 的形成 机理。 红褐色固体，即胆红素钙 。 1．3．2 AGP／CaBR样 品的制备 在 0．9％ NaCI溶液 中加入 AGP，配成 1mg · 收稿 日期 ：2002．10．10。收修改稿 日期：2003．01．10。 国家 自然科学基金资助项 目 No．座机电话号码，座机电话号码 ，国家教育部重点项 目 No+00180 以及安徽省 自然科学基金项 目 No．0045115 。 ★通讯联系人 。E．mail：s—yuhua@ 163．corn 第一作者：谢安建，男，45岁，副研究员；研究方 向：生物无机化学及分子有序膜 。 维普资讯 · 362 · 无 机 化 学 学 报 第 19卷 mL 的AGP溶液 。然后分别按 AGP和 CaBR质量 比为 1：1，1：5，1：15，1：25的比例将两者混合，室温 3．2 下充分搅拌后，离心分离，弃去沉淀。滤液称 AGP／ 2．8 CaBR溶液，分成三部分 ： 1 用优级纯硝酸消解后， 2．4 配成 2％的硝酸溶液，测定钙离子含量； 2 用 0．9％ 2．O NaC1溶液稀释 10倍，测定紫外可见光谱； 3 将滤 液滴加在 KBr晶体上，干燥后压片，测定红外光谱 。 1．6 2 结果与讨论 1．2 O．8 2．1 FT—IR光谱 图 1为纯 AGP溶液 A 和不 同反应质量 比的 O．4 AGP／CaBR溶液干燥后 的红外光谱，其主要数据见 OO 4000 3