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双波长微板赖氏法自动化检测alt的研究
第 11 卷 第 4 期 河南医学研究 Vol. 11 No. 4
2002 年 12 月 HENAN MEDICAL RESEARCH December 2002
( )
文章编号 :1004437X 2002
双波长微板赖氏法自动化检测 AL T 的研究
邢培清 , 刘玉振 , 方建华 , 温 涛 , 李伍升
(河南省红十字血液中心 河南郑州 450053)
摘要 : 目的: 改变手工试管赖氏法操作使之成为自动化条码传送微板赖氏法的操作 , 同时为了克服轻度脂血对
结果的影响。方法 : 采用方阵法和正交试验设计方法 ,筛选微板赖氏法最佳浓度和加液量 ;利用双波长等吸收的
μ μ
特点 ,消除轻度脂血吸收的干扰。结果 : 液体总量有赖氏试管法的 6100 l 缩小为赖氏微板法的 270 l ;采用双波
长 492 nm 、630 nm 检测 ;该法检测 2001 年卫生部临检中心发放的 ALT 室间质控物品 ,准确度为 100 % 。结论 : 本
研究填补了国内血站系统赖氏法 ALT 长期手工操作的局面。该法省工省时 ,操作简便 ,可实现检验结果的网络
传送。
关键词 : 微孔板 ; ALT; 赖氏法 ; 自动化
中图分类号: R44611+ 2 文献标识码 : B
) ( )
随着计算机管理和条码技术在血液检测中的应 板本 :modern 2000TM V 50 ;Sever 服务器 美国惠普 ;
用 ,酮体酚法和传统赖氏试管法 ,不能满足血液检测的 网络操作系统软件为 PCMACLAN/ Win 2000 NT 50 ;D
自动化、标准化及网络化的要求。为了解决以上问题, - Link 24 插口集线器 ;每个工作站安装有网卡 ,工作
国内一些血站 ,采用微板速率法[1 ] 进行供血者 ALT 测 站和集线器连接方式为拓扑星型 ;传输介质为每根有
定 ,结果判读可以信息传递网络化 ,但该法成本较高 , 8 条双绞线连接线组成 ;数据库软件为 Sybase SQL serv
整个微板在室温下加 37 ℃反应液 , 温度无法确切控 er for windows NT110 ;条码选用 barcode128 。
制 ,且存在强阳性漏检等弱点。为此 ,我们尝试将赖氏
2 方法
法检测 ALT[2 ]从试管移至微孔板上 ,将各种先进的自
动设备组合使用 ,通过大量实验 ,确定了样品、基质、2 , 21 确定样品 、基质、2 ,4二硝基苯肼加液量 样品、
4二硝苯肼的最适加液量、以及 NaOH 的最佳浓度和 基质、2 ,4二硝基苯肼等 3 种物质同时都按原试管法
加液量。该法充分利用 ELISA 的方法来判断 ALT 是 的005 、010 、015 倍的加液量进行选择。按正交试验
否大于 25 卡门单位 ,其结果的准确度和精密度[3 ,4 ,5 ,7 ] 设计出 NaOH 对应的缩小倍数的所需其浓度和加液量
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