第二组伊利牌小布丁雪糕中还原糖的测定.docVIP

伊利牌小布丁雪糕中还原糖的测定 实验目的 掌握还原糖和总糖的测定原理，学习用直接滴定法测定还原糖的方法。 二、实验原理 试样经除去蛋白质后，在加热条件下，以亚甲基蓝作指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸溶液，根据样品液消耗体积计算还原糖含量。 仪器设备 电热恒温水浴锅、调温电炉(带石棉板)、250ml锥形瓶、滴定管、分析天平、容量瓶、移液管 实验材料 1、试剂 （1）碱性酒石酸铜甲液: 称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g亚甲基蓝，溶于蒸馏水中并稀释到1000ml。 （2）碱性酒石酸铜乙液: 称取50g酒石酸钾钠及75g NaOH，溶于蒸馏水中，再加入4g亚铁氰化钾［K4Fe（CN）6］，完全溶解后，用蒸馏水稀释到1000ml，贮存于具橡皮塞玻璃瓶中。 （3）0.1％葡萄糖标准溶液: 准确称取1.000g经98～100℃干燥至恒重的无水葡萄糖，加蒸馏水溶解后加入5ml盐酸，并用水稀释定容至1000ml。 （4）乙酸锌溶液： 称取21.9g乙酸锌。吸取3ml冰醋酸，加水溶解定容到100ml。 （5）10.6%亚铁氰化钾溶液： 称取10.6g亚铁氰化钾，加水溶解定容到100ml。 2、材料 伊利牌小布丁雪糕 （购于超市） 样品预处理 准确称取 2.5-5g雪糕，置于250ml容量瓶中，加水50ml,摇匀后慢慢加入5ml乙酸锌及5ml亚铁氰化钾溶液，并加水至刻度，摇匀，静置30分钟。过滤，弃去初滤液，收集续滤液备用。 检测步骤 1、斐林试剂的标定 准确吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5.00ml，置于250ml锥形瓶中，加蒸馏水10ml，加玻璃珠3粒。从滴定管滴加约9ml葡萄糖标准溶液，加热使其在2min内沸腾，准确沸腾30s，趁热以每2s 1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。平行操作3次，取其平均值，按下式计算： F=cV 式中：F──10ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量，mg； C──葡萄糖标准溶液的浓度，mg/ml； V──标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积，ml。 2、样品测定 (1)样品溶液预测定：吸取碱性酒石酸铜甲液及乙液各5.00ml，置于250ml锥形瓶中，加蒸馏水10ml，加玻璃珠3粒，加热使其在2min内沸腾，准确沸腾30s，趁热以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品溶液，滴定时要保持溶液呈沸腾状态。待溶液由蓝色变浅时，以每2s 1滴的速度滴定，直至溶液的蓝色刚好褪去为终点。记录样品溶液消耗的体积。 (2)样品溶液测定：吸取碱性酒石酸铜甲液及乙液各5.00ml，置于锥形瓶中，加玻璃珠3粒，从滴定管中加入比预测时样品溶液消耗总体积少1ml的样品溶液，加热使其在2min内沸腾，准确沸腾30s，趁热以每2s 1滴的速度滴定，直至溶液的蓝色刚好褪去为终点。记录消耗样品溶液的总体积，同法平行3次，取平均值。 结果计算 还原糖（以葡萄糖计，%）=F×100/[m×(V/250)×1000] 式中：m──样品质量，g； F──10ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量，mg； V──测定时平均消耗样品溶液的体积，ml； 250──样品溶液的总体积，ml； 注：还原糖含量≥10g/100g时，计算结果保留三位有效数字；还原糖含量＜10g/100g,计算结果保留两位有效数字。 数据记录表 （1）斐林试剂的标定 测定次数 1 2 3 葡萄糖标准溶液浓度（mg/ml） 标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积（ml） F（mg） （2）样品的测定 测定次数 1 2 3 标定碱性酒石酸铜溶液所消耗的葡萄糖标准溶液的体积/ml F（10ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量）/mg 测定时消耗样品溶液的量/ml 平均消耗样品溶液的量/ml 样品还原糖的含量（%） 九、注意事项 （1）滴定必须是在沸腾条件下进行，其原因一是加快还原糖与Cu2＋的反应速度；二是亚甲基蓝的变色反应是可逆的，还原型的亚甲基蓝遇空气中的氧时会再被氧化为氧化型。此外，氧化亚铜也极不稳定，易被空气中的氧所氧化。保持反应液沸腾可防止空气进入，避免亚甲基蓝和氧化亚铜被氧化而增加消耗量。 （2）滴定时不能随意摇动锥形瓶，更不能把锥形瓶从热源上取下来滴定，以防止空气进入反应溶液中。 （3）影响测定结果的主要操作因素是反应液碱度，热源强度，煮沸时间和滴定速度。 十、组员分工 (1)购买样品及样品的预处理 (2)费林试剂的标定 (3)样品测定 (4)仪器准备、记录数据 计算结果 食品中还原糖的测定 4