菌渣效价检测方法委托检测.docVIP

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2016-09-15 发布于重庆
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菌渣效价检测方法委托检测.doc

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菌渣效价检测方法委托检测

菌渣中粘菌素检测方法 1.1、检验程序 1.1.1、试液制备样品溶液：准确称取5g待检样品到50mL容量瓶中，加入mL左右0.05M的硫酸超声处理30分钟，用稀释到50.0mL摇匀即可。、标准品溶液：准确称取25.0mg标准品到50mL容量瓶中，用稀释到50.0mL。将上述溶液分别用孔径0.22um的水系和油系微孔滤膜滤过，贮存于样品小瓶中。 1.1.2、流动相制备 1）、流动相: 将试液a与乙腈按78：22（v/v）混合抽滤。试液a是由4.46g无水硫酸钠溶解到900mL水中，用磷酸调H至2.4，用水稀释至1000mL而成。 2）、: 乙腈和水按22∶78的体积配比，混匀后抽滤，装入瓶中备用。 1.1.3、色谱条件色谱柱：150mm×4.6mm 固定相： C18 3.5um 柱温： 30℃ 检测波长：215nm 流速：1.0mL/min 进样量：20ul 运行时间：1.5倍粘菌素E1保留时间。待仪器稳定后标准品溶液进两针，计算这两针校正因子的相对平均偏差不大于2.0%，然后进处理好的样品，根据公式计算效价。 F= F ：校正因子 A标：的生物效价 m标: 称取的质量：E1与E2峰的峰面积之和 50：稀释倍数1.2.1系统适用性要求 E2和E1峰的分离度不小于8.0，E2和E1-I峰的分离度不小于6.0，E1-I和E1峰的分离度不小于2.5，E1和E1-7MOA峰的分离度不小于1.5。 R=1.18× R：分离度 :Ref峰的保留时间：Ei峰的保留时间：Ref峰的半高峰宽：Ei峰的半高峰宽、效价计算结果P=（×As样×50）/ P(u/mg)：样品的效价 As样：样品的E1、E2峰的峰面积和 F: 计算效价校正因子：样品Ei峰的百分含量 A：样品Ei峰的面积 m1：样品的质量 FEi：计算含量校正因子河北圣雪大成制药有限责任公司 2014--4