纳米材料作为miRNA载体及与细胞的相互作用的研究.pdfVIP

rr r 目录 iiYiIrlJ12i 4II f F13ii oIi 14Flllloii掣 目录…………………………………………………………．：…………………………．．1 摘要……………………………………………………………………………………………………………………．5 Abstract．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．…．7 中英文略语表……………………………………………………………………………．9 第一章绪论……………………………………………………………………………．10 1．1RNAi与siRNA递送………………………………………………………………．10 1．2纳米载体概述………………………………………………………………………．．11 1．3纳米材料作为siRNA递送载体的要素……………………………………………12 1．3．1纳米材料对siRNA分子的保护………………………………………………．13 1．3．2纳米材料在体内的靶向递送…………………………………………………．13 1．3．3纳米材料进入细胞的能力……………………………………………………．14 1．3．4纳米材料对siRNA溶酶体逃逸的影响………………………………………．14 1．3．5纳米材料作为siRNA载体时的细胞毒性…………………………………．．16 1．4．1 AuNRs的合成及特性…………………………………………………………．．17 1．4．2AuNRs在生物医药领域的应用研究进展……………………………………一19 1．4．3AuNRs与细胞的相互作用……………………………………………………．．20 1．4．4细胞内AuNRs的表征…………………………………………………………20 1．6．本课题的研究思路和意义………………………………………………………．．22 1．6．1 AuNRs作为PAR-1siRNA载体抑制乳腺癌细胞转移功效的研究…………．．22 参考文献…………………………………………………………………………………23 第二章材料、仪器设备和实验方法…………………………………………………．．3l 2．1主要材料和试剂……………………………………………………………………31 2．2主要实验耗材和仪器设备…………………………………………………………．．32 2．2．1主要实验耗材…………………………………………………………………．．32 2．2．2主要仪器设备…………………………………………………………………．．32 2．3实验方法……………………………………………………………………………33 2．3．1 AuNRs在细胞内定位的评价…………………………………………………．．33 2．3．1．1细胞培养…………………………………………………………………．．33 2．3．1．2AuNRs的制备和修饰……………………………………………………．．33 2．3．1．4AuNRs孵育后细胞骨架的观察…………………………………………．．34 2．3．1．5TEM样品制备和观察……………………………………………………．．34 2．3．1．6 ICP．MS测试………………………………………………………………．35 2．3．1．7含AuNRs细胞的活细胞观察……………………………………………．35 2．3．1．8Westernblot…………………………………………………………………35 2．3．2活细胞内AuNRs的定量………………………………………………………36 2．3．2．1含不同血清或白蛋白培养基的配置……………………………………．36 2．3．2．2UV．Vis-NIR光谱测量……………………………………………………．．36 2．3．2．4 TSPR峰面积的计算………………………………………………………．36 2．3．2．5细胞裂解