长链非编码RNA-HOTIRM1、TP53TG1在人神经胶质瘤中的表达分析以及其与糖代谢关系的初探.pdf

北京协和医学院硕士研究生论文 目 录 摘 要…………………………………………………………………………．1 Abstract．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3 前 言………………………………………………………………………………5 技术路线…………………………………………………………………………。9 实验材料…………………………………………………………………………．10 实验方法…………………………………………………………………………。15 结果…………………………………………………………………………………．23 讨 论…………………………………………………………………………。40 小 结．。．．。。。．。．．．．。。．。。。。。．。。。．。。．．．。。。。．。。。．．．．．。．．。．．．。．．．。。44 不足与展望……………………………………………………………………45 参考文献………………………………………………………………………46 综 述…………………………………………………………………………。50 附 录…………………………………………………………………………。61 个人简历……………………………………………………………………．62 致 谢………………………………………………………………………。63 北京协和医学院硕士研究生论文 摘 要 RNA，IncRNA)是一种内源性、长度超过 长链非编码RNA(10ngnoncoding 200个核苷酸、不编码蛋白的转录物。随着转录组测序的进步，越来越多的证 据表明长非编码RNA在细胞生物学中参与多重层次的调控功能，包括在表观 遗传水平，转录水平，以及转录后水平调控基因的表达。具体作用方式包括： 参与组蛋白修饰复合物的组装过程，促进激素信号传导通路的激活，参与 mRNA的转录后加工过程如剪接，通过同源区域与mRNA产生直接相互作用 能等。 RNA antisense lncRNA可以影响肿瘤中的抑癌信号通路。如HOX transcript 2，PRC2)招募到抑癌基因座位上，抑制抑 物2(PolycombRepressiveComplex 癌基因的表达，从而促进肿瘤增殖并抑制凋亡。另外，在DNA损伤等应激状 态下，P53可以直接诱导taurine upregulated 些lncRNA通过与蛋白相互作用，调控与细胞周期相关基因的表达。 肿瘤具有独特的能量代谢特征。肿瘤细胞的生长增殖需要充足的物质和能 量来维持，通过以下途径实现：1)增加对糖、谷氨酰胺的摄取；2)依赖糖酵 解供能，而不是氧化磷酸化，即具有瓦伯格(Warburg)效应；3)合成更多的 ATP、脂类、氨基酸和核酸；4)改变糖代谢过程中关键酶的活性等。 2012年，香港大学的研究人员利用lncRNA芯片，在两组人神经胶质瘤临 床样本(一组268例，另一组独立样本157例作为验证)中筛选差异表达的 差异高于2倍。我们希望从中寻找对胶质瘤细胞糖代谢起重要作用的lncRNA， antisense 选取HOXA反义转录物髓系异构体1(HOXA RNA， transcript 1．HOTAIRMl)和TP53