Rho激酶在大鼠肠缺血再灌注肝肠损伤中作用及法舒地尔预处理对其影响.pdfVIP

Rho激酶在大鼠肠缺血再灌注肝肠损伤中 的作用及法舒地尔预处理对其的影晌 硕士生姓名： 胡晓薇 指导教师： 姚继红教授 指导小组： 姚继红教授 专业名称： 药理学 摘 要 目的：小肠缺血再灌注(intestinalischemia 于肠道及其系膜血管自身疾病外，还可继发于多种临床疾病的病理生理 过程中，引起全身系统性损伤，而肝脏则是肠缺血再灌注损伤的最直接 器官。本课题旨在研究Rho激酶(Rhokinase，ROCK)在肠缺血再灌注 肝肠损伤中的作用机制及法舒地尔(Fasudil)预处理对肠缺血再灌注肝 肠损伤的保护作用，并在分子水平为该药物的临床应用提供实验依据。 方法：将24只健康雄性SD大鼠随机分为4组：(1)假手术组(正 常对照组)；(2)肠缺血再灌注组(I／R组)：(3)低剂量法舒地尔预处理 组(7．5mg／kg)；(4)高剂量法舒地尔预处理组(1 mesenteric 预处理组用无创的动脉夹夹闭肠系膜上动脉(superior artery， SMA)1 h，松夹后再灌注2h，建立大鼠肠缺血再灌注损伤模型：Fasudil 预处理组术前1h腹腔内注射一定量的盐酸法舒地尔注射液；对照组仅进 行剖腹术及SMA分离术。再灌注结束后，采集血液和肝肠组织样本。光 镜下观察病理石蜡切片肝、肠组织的形态学改变，测定肝功和肌酸激酶 kinase (creatineB，CK．B)水平，测定肝、肠组织中超氧化物歧化酶 (superoxide necrosis MPO)活力，检测血清中肿瘤坏死因子．a(tumorfactor·a，TNF—a) NO 测组织中内皮源性一氧化氮合酶(endothelial 激酶(P．Moesin)蛋白表达的情况。 结果：l、1与假手术组相比，I／R组：(1)镜下可见肝、肠组织出现 明显的病理性损伤，表现为肝、肠组织水肿、出血和炎性细胞浸润。(2) 血清酶学检测：血清中丙氨酸氨基转移酶(Alanine ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate 织发生脂质过氧化损伤，机体的氧自由基清除能力下降，‘白细胞浸润增 多。(4)血清中TNF．0【和IL．6的水平明显升高(P0．0l，P0．01)。(5) 处理后，与I／R组相比，不同剂量法舒地尔预处理组：(1)组织形态学 可见肝、肠组织病理损伤程度明显减轻。(2)肝功能有所改善，表现为 伤及白细胞浸润程度有所缓解，自由基清除能力增强，表现为组织中 eNOS表达水平显著增强，P．Moesin表达水平减弱。 结论：(1)小肠缺血再灌注可以导致严重的肝肠组织损伤，损伤表 现包括中性粒细胞浸润聚集、氧化性损伤、细胞因子激活等。(2)肠缺 血再灌注肝肠损伤的机制较复杂，其发生和发展与Rho／Rho激酶通路的 激活有关。(3)法舒地尔预处理对肠缺血再灌注导致的肝肠损伤有明显 的保护作用，包括氧化性损伤减轻、中性粒细胞活性减弱、降低TNF．(It 和IL．6的水平、上调eNOS活性等。这种保护作用与Rho激酶的抑制有 关，且呈剂量依赖性。 关键词：法舒地尔 肠缺血再灌注 肝损伤 Rho激酶细胞因子 2 TheroleofRho kinaseon liver andintestine injUry induced intestinal by inratsand