鳕鱼皮胶原蛋白肽对大鼠胃黏膜的保护作用和研究.pdf

谨以此论文献给所有指导和帮助我的老师 献给关心和帮助我的人 王志聪 鳕鱼皮胶原蛋白肽对大鼠胃黏膜的保护作用研究 摘要 鳕鱼皮胶原蛋白肽是以鳕鱼皮胶原为原料经多种蛋白酶水解后的产物，其具 有多种生理调节功能，如美容护肤、补钙健骨、止血免疫等功能。市场上也有宣 传其对胃黏膜具有保护和修复功能，但未有相关系统的研究提供理论依据。本论 文从鳕鱼皮中提取胶原蛋白并酶解成不同分子量段的胶原蛋白肽，研究不同分子 量段的鳕鱼皮胶原蛋白肽（CCP ）对胃黏膜的保护作用，并揭示可能机理，为胶 原蛋白肽的应用提供理论依据。 1.以鳕鱼皮为原料，结合酸法与热水法提取胶原蛋白，采用复合酶法酶解胶 原蛋白，确定了最大量制备高（Mw ﹥8k Da ）、中（3k Da～8k Da ）、低（Mw ﹤ 3k Da ）三个分子量段CCP 的最佳酶解时间分别在15 min、40 min、2.5 h 左右。 选用截留分子量为3k、8k 的超滤膜，对鳕鱼皮胶原蛋白水解产物进行超滤粗分 离，得到不同分子量段的鳕鱼皮胶原蛋白肽（CCP ），冻干后对胶原蛋白和CCP 进行基本成分分析，各样品的纯度达到80% 以上，各样品的平均分子量在其所属 的分子量段，满足动物实验对受试物的要求。 2.采用酒精致急性胃黏膜损伤动物模型，探究 CCP 对胃黏膜急性损伤的预 防保护作用。胃组织病理性观察结果表明，预先给予一定剂量的 CCP ，能够有 效地保护胃黏膜，减轻高浓度酒精引起的胃粘膜损伤指数，以中分子量的 CCP 效果最好，与未酶解的胶原蛋白效果相近。 3. CCP 及胶原蛋白能够提高胃黏膜黏液屏障的水平，保护胃黏膜降低氢离 子和炎症细胞的浸润侵袭；提高体内GSH 的含量，有效地清除机体内的自由基， 维持胃组织较高的抗氧化酶（SOD、GSH-PX ）活力，降低由自由基引起的氧化 反应及其产物如MDA 胃黏膜的攻击损伤；使其发挥对胃黏膜保护的调控作用。 4. 采用乙酸致慢性胃溃疡模型，探究CCP 对胃溃疡的辅助修复作用。实验 结果表明，造模后给予一定剂量的CCP，胃溃疡的修复效果明显好于未给与受试 样品的模型组，溃疡指数明显降低，效果接近阳性药物组。 5.乙酸灼烧后给予 CCP 及胶原蛋白，也能提高胃黏膜屏障的水平，保护溃 疡部位减轻胃液氢离子的进一步破坏；CCP 能提高体内GSH 含量，有效清除乙 酸灼烧产生的自由基，降低血清 MDA 及诱导型 NO 含量，维持血清 SOD 和 I GSH-PX 较高的活力水平，减轻溃疡部位修复组织的损伤；通过对溃疡修复相关 因子在胃组织中mRNA 的表达水平的检测发现，胃溃疡的修复过程涉及多种生 长因子和细胞因子的参与，包括血管内皮生长因子（VEGF ）、表皮生长因子 （EGF ）、转化生长因子（TGFβ ）、热休克蛋白70 （HSP70 ）和免疫细胞因子（IL-1 l β、IL-2 ），其中低分子力量的CCP 能促进HSP70 mRNA 的表达水平，促进溃 疡修复。故 CCP 能够通过降低机体自身对溃疡的进一步损伤及促进机体修复因 子表达的方式，达到对胃溃疡辅助修复的作用。 关键词：鳕鱼皮胶原蛋白肽；酒精性胃损伤；胃溃疡；保护作用 II Study on the protective effect of Cod skin collagen peptide on the gastric mucosa in rats Abstract Cod skin collagen peptide is the enzymolysis product of cod skin collagen, which is hydrolyzed by kinds of protease. It has a variety of physiologic function, such as beauty