江苏地区猪圆环病毒2型的分离鉴定和嵌合型PCV1-2+206佐剂灭活苗对商品猪的免疫保护的研究.pdf

摘 要 206 江苏地区猪圆环病毒2型的分离鉴定和嵌合型PCVl—2 佐剂灭活苗对商品猪的免疫保护研究 摘 要 研究生：汪正亮 导 师：高崧教授 circovirus 猪圆环病毒2型(porcinetype circovirusassociated and reproductiverespiratory 20thIntemational 届国际猪病大会(The PigVeterinarySocietyCongress，20thIPVS)上，曾 将其列为危害养猪业发展的头号疫病。我国自2000年郎洪武首次报道猪群中存在PCV2 抗体以来，各地陆续报道，表明感染范围已波及全国。 本文旨在检测江苏部分猪场PCV2的流行情况，为PCV2相关疾病的防制提供参考。 商品猪，并对免疫猪攻击PCV2。通过对免疫攻毒猪的相关指标进行观察、分析，以评价 该灭活疫苗对于预防PCV2感染的有效性。 1猪圆环病毒2型的分离鉴定 在扬州某规模化屠宰场(屠宰猪来自江苏部分地区)进行采样，通过PCR方法检测 定。 对全基因组进行测序后发现，分离到的5个PCV2分离株的基因组全长均为1767 bp， ORF2序列全长为705 摘 要 发生树显示5个分离株均属PCV2 1亚型，即PCV2b。其亲缘关系近，属进化树的 group 1C与它们的同源性最为接近， 同一个微小分支。广东分离株group1C和荷兰分离株group 同属于一个大的分支。流行病学调查表明，PCV2 1即PCV2b已成为目前江苏地区 group 了材料。 2嵌合型PCVl—2病毒灭活苗对商品猪感染PCV2免疫保护效力的研究 本文运用多功能细胞电穿孔仪将本实验室构建的嵌合型猪圆环病毒1．2型DNA克隆 一次，第二次免疫后14天攻击PCV2毒株。 结果表明，二免后14天，所有免疫组试验猪都表现为血清学阳性，可检测到高滴度 检，免疫组猪的淋巴结和各脏器的大体和显微病变都比攻毒对照组轻微。攻毒对照组猪 的淋巴结出现多核巨细胞和嗜酸性粒细胞，且有大量的淋巴细胞缺失，免疫组未见多核 巨细胞，淋巴细胞缺失也少见。荧光定量PCR测得腹股沟淋巴结中PCV2病毒载量在攻 地诱导免疫猪产生针对PCV2感染的保护性免疫应答。 免疫保护 Abstract 一 。 ‘ 。 ‘ 。 ‘一 ‘ ^ ● ● ● 一 ● 一● 2in IsolationandidentifiCationof clrcOVlrusJ Oorclne type andthe inducedchimericPCV1·-2 provinceprotectiveefficacy by inactivatedvaccineemulsifiedwith206uvant