GBE50对脑缺血损伤的保护作用机制及研究.pdf

中文摘要 GBESO对大鼠脑缺血损伤的保护作用及其机制研究 摘要 目的：研究新型银杏叶提取物GBE50对高脂血症大鼠脑缺血．再灌注损伤的保护作用及 对血管内皮细胞功能的影响，并从热休完蛋自HSP70和线粒体功能角度探讨 GBE50对脑缺血预防和保护作用的药理作用机制。 方法： 1．GBES0对高脂大鼠MCAO模型的影响 进行实验，将这些大鼠随机分为7组，即①假手术组(Sham)；②模型组(Model)； ③阿司匹林组(ASP 6．5mg／kg)：④GBE50小剂量组(50 mg／kg)：⑤GBE50中剂 量组(100 mg／kg)；⑦正常饲料喂养组。各组动 mg／kg)；⑥GBE50大剂量组(200 物灌胃给药，1次／d(①、②组给予生理盐水)。给药2周后即进行大脑中动脉栓塞 (MiddleCerebralOcclusion，MCAO)手术，缺血l h，再灌注23 Artery h。按Longa 5分制评分标准对大鼠进行神经行为学评分：采用TTC染色法及[mageTool软件进 行脑梗死体积测定；抗凝血进行血液流变学测定。蕊察GBE50对高脂血症大鼠脑缺 血再灌注损伤后脑梗死体积、神经行为学及血液流变学的影响。 2．GBES0对培养脑血管内皮细胞的影响 传代培养小鼠脑血管内皮细胞bEnd．3。以2．5 ms／t．的LPC为致内皮细胞损伤 GBE50的无血清培 条件。LPC损伤前lh，分别用含12．5、25、50、100、200 mg／L 养基预处理内皮细胞，加入LPC后置37℃、5％C02培养箱中继续培养23h。测定 培养液LDH的含量反映细胞损伤程度，分别测定各组培养液NO和ET的含量及 NOS、SoD、GSH．PPx活力，观察GBE50对血管内皮细胞的作用。 3。GBE50保护作用的机制研究 3．1 免疫组化法测定脑组织H$1wT0蛋白的表达： sD大鼠，雌雄兼用，体重(50±10)g时，给予高营养饲料，体重增加至(230 ±20)g时进行实验，将这些大鼠随机分为6组，即①假手术组(Sham)．②模型组 6 (Model)；⑧阿司匹林组(ASP mg／kg)；⑤OBES0 5mg／kg)；④GBES0小剂量组(50 中剂量组(100 mg／kg)。各组动物灌胃给药，1 mg，lcg)；⑥GBE50大剂量组(200 Cerebral 汐咖，(①、②组给予生理盐水)。给药2周后即进行大脑中动脉栓塞(Middle h后，心脏灌流固定脑组织， Occlusion，MCAO)手术，缺血1h，再灌注23 Artery 取脑，冰冻切片，用免疫组化法测定脑组织HSP70蛋白的表达，观察GBE50对脑 缺血后礤疆叮O蛋白表达的影响。 中文摘要 3．2 Clark氧电极法铡定线粒体呼吸功能：