具双T-DNA区大麦黄矮病毒复制酶基因双链RNAi植物表达载体构建.pdf

i植物表达 具双T-DNA区的大麦黄矮病毒复制酶基因双链RNA 载体构建 植物资源的保护与利用专业 研究生：孙文瑜 指导教师：傅体华教授 摘要 大麦黄矮病毒(Barleyyellow 以循徊型持久传播，病毒粒体在蚜虫体内不增殖，不能通过汁液摩擦接种。禾谷类黄 矮病毒病是由大麦黄矮病毒引起的，在小麦、大麦、燕麦和黑麦等多种作物上广为传 播的一种毁灭性病毒病害，造成产量损失，同时还劣化谷物品质，它的发病面积和危 害程度呈逐年扩大和加重趋势。BYDV．GAV是当前我国流行的病毒株系。由于栽培 品种中的抗黄矮病基因极少，因此传统的抗黄矮病育种方法进展缓慢，采用基因工程 技术手段研究新的抗黄矮病毒的技术已成为目前抗黄矮病育种工作的关键。 而通过RNA干扰有效抑制病毒复制酶基因表达，从而阻止病毒在寄主体内的繁殖和 终止子和复制酶基因发卡RNA反向重复序列的片段酶切后，克隆到中间表达载体 目的基因表达框和选择标记基因表达框置于双边界的T-DNA载体内，易于从分 离群体中选择得到剔除选择标记的转基因植株，为进一步通过根癌农杆菌介导的遗传 转化，培育无选择标记基因的抗黄矮病转基因作物奠定基础。 关键词：大麦黄矮病毒BYDV，RNAi，双T．DNA区表达载体 oftwin vector ConstructionT-DNAs expressingencoding RNA the of dwarf hairpinusingreplicasegenebarleyyellow VlrUS Abstract dwarf isa strandRNAvirusis Barleyyellow virus(BYDV)whichsingle transmitted dwarfdiseaseofcerealsiscaused BYDV,which byaphids．Theyellow by infects cereal and itsoutbreaksCan major cropsincluding rye，and wheat，barley,oats cause lossinthese isthemainBYDVin devastating crops．BYDV-GAV ChiIla，currently, andinrecent theareaofcereal the causedBYDV years affected，anddamagesby crops diseaseshavebeeninCreased．RareBYDVresistancewerefoundincultivated genes new forBYDVresistance诵th technology speci