生物荧光成与人嗜中性粒细胞信号转导动力学的研究.pdf

中 文摘要 摘要 耗散结构理论在物理、化学、生物乃至社会等领域得到了广泛的应用，尤 其是近年来在生命科学研究中的应用更是得到了重视，如在信号转导网络调控、 免疫系统防御与杀伤调控、胚胎发育调控等研究。在本论文中，我们以耗散结 构理论为指导，开展了人嗜中性粒细胞内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(磷酸) Nicotinamide [Hydrogenated Adenine (Ca2+)信号转导动力学的研究。 人嗜中性粒细胞是免疫系统重要组成之一，其信号转导动力学过程具有耗 散现象，如已发现NAD(P)H和Ca2+信号在细胞内转导过程呈现时空有序性的耗 散模式。目前，活体细胞内信号转导过程中时空信息的有效获取主要依赖于活 体荧光成像技术。因此我们构建了显微弱光高时空分辨率成像系统，可实现毫 秒级信号连续采集，同时保证空间信息的获取。依托该系统，本论文在单个嗜 中性粒细胞水平上研究了NAD(P)H自体荧光的探测问题，最终克服了NAD(P)H 自体荧光强度较弱、易漂白淬灭，以及紫外激发光对细胞光毒性影响等难题， 实现了该荧光信号在单个嗜中性粒细胞水平上的实时、快速、可视化成像，从 而为研究单个嗜中性粒细胞内NAD