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摘 要
linileic
acid，CLA)是目前公认的具有抗氧化、抗癌、
共轭亚油酸(Conjugated
减肥降脂、调节免疫力等多种生理功能的健康营养品，已广泛应用于饲料、食品、医
药等多个领域，目前已成为研究的热点。许多微生物体内都含有亚油酸异构酶(1inoleic
acidisomerase，LAI)，它可将亚油酸(1inoleicacid，LA)催化生成CLA，其中，植
物乳杆菌和德式乳杆菌的转化效率最高。植物乳杆菌P．8是源自内蒙古乌拉特中旗的
优良发酵菌种，经研究表明该菌具有降血脂和改善胃肠道微生物群落结构等特性，并
且可高效产生CLA。因此，对植物乳杆菌P．8亚油酸异构酶基因结构的研究与改造
具有重要的理论和实用价值。
基因敲除技术是研究基因功能的方法之一，能精确定点的修饰和改造目的基因，
而且经改造的基因片段能随着基因组的复制而稳定遗传，目前已广泛应用于各类生物
的研究。
文章利用同源重组基因敲除技术原理，构建了植物乳杆菌P一8肠f的敲除载体，
并对外源质粒电转化植物乳杆菌P．8的条件进行研究，为肠f的敲除奠定了基础。根
pMDl9．T载体上切下并成功构建到pUCl8载体上，最终得到的同源重组敲除载体，
1
命名为pUC
化条件为：菌体在3％甘氨酸处理培养4h后，经2kV电压电击，最后接种于含0．4mol／L
蔗糖的复苏培养基中。
关键词：植物乳杆菌；亚油酸异构酶；基因敲除；电转化
Vector
Constructionof RecombinationGeneKnockout
Homologous
oflaiandTransformation ofLactobacillus
byElectroporation
P·-8
plantarum
Abstract
a hasa of
CLAis considerednutrition，whichvarietyphysiological
currently healthy
functionssuchas etc．
immunity
anti-oxidation，anti-cancer,lipid-loweringdiet，regulating
Ithasbeen usedin fieldsof and ontheCLA’S
feed，food，medicine
widely many people
hot containlinoleicacid
researchhasbecomea spot．Manymicroorganisms isomerase，
whichCan theLA CLA．LactobacillusandLactobacillus
catalyze generated plantarum
Lactobacillusdelbrueckiihavethe conversion P-8i
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