重组戊型肝炎病毒衣壳蛋白工程菌的高密度培养.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’( )! *’ ) # 年 月 !$ % !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 +,- !$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 重组戊型肝炎病毒衣壳蛋白工程菌的高密度培养 0 0 0 0 ! 刘如石 何志强 李少伟 杨坤宇 鲜阳凌 ! 0 ! 0 逄淑强 张 军 李益民 夏宁邵 0 （厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室，厦门 #50% ） ! （北京万泰生物药物有限公司，北京 0!! ） 摘 要 在 发酵罐中对戊型肝炎病毒衣壳蛋白在重组大肠杆菌中表达发酵工艺进行了研究，用分批培养方法 0B 探讨了不同培养基、培养基中磷酸盐浓度和+! C 浓度等因素对菌体生长与重组蛋白表达的影响；用分批补料培养 研究了不同的补料工艺对菌体生长与重组蛋白表达的影响，同时对重组菌诱导时期、诱导持续时间以及不同诱导 温度表达包含体在尿素溶液中的溶解性进行了研究。结果表明，在优化后的培养基中，磷酸盐浓度、 ! C 浓度分别 + 为 与 时菌体生长与表达效果较好；分批补料培养中， 培养 菌体达到对数期中期（约 488’(D B !88’(D B #E F /G $% 34 ）为适宜诱导时期，加入终浓度为 后诱导 ， 达到 以上，重组蛋白表达量达到 5 0H88’(D B IJ2K %G 345 4 ，为最适收获菌体时间； 表达的包含体 以上溶解在 的尿素溶液中，最终浓度达到 ； !/ HE$ L #E F 4 L $8’(D B 0$8D8B 发酵罐中确定的发酵工艺参数在 发酵罐中进行了放大培养， 发酵罐中确定的发酵工艺参数在 发酵 0B #B 0B #B 罐上具有可放大性与重复性，可以应用于工业生产。 关键词 戊型肝炎病毒，衣壳蛋白，重组大肠杆菌，高密度培养 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） 2M/! H 0 N 0.#50 !$ #.$%.5 戊型肝炎病毒（ ）是近年新发现的一种