化学发光在物及生物分析中的应用研究.pdfVIP

I I Ill IlllI IIlll lll …III 22 Y19431 摘要 摘 要 化学发光分析法具有仪器设备简单、易于实现自动化等显著优点，成功应 用于化学及生物分析领域，与其他技术的联用进一步促进了化学发光技术的快 速发展，拓展了其应用领域。本文首先将化学发光技术应用于传统药物分析中， 针对只溶于酸性介质的药物建立了碱性条件下测定的新方法。在以上工作的基 础上，将化学发光技术与纳米技术相结合，建立了超灵敏的免疫分析方法，构 建了几种新型化学发光传感器。本论文的具体内容包括以下几部分： 1、本章对化学发光分析法及其在药物分析中的应用，以及化学发光分析法 与纳米技术联用的现状进行了综述。首先介绍了化学发光分析法的发展、概念、 原理以及基本装置；详细介绍了化学发光分析法的原理及在药物分析中的应用； 综述了纳米材料在化学发光分析领域中的应用。在以上基础上，提出和开展了 本论文的主要研究内容。 2、甲氧氯普胺只能溶于酸性介质中，使得碱性条件下用流动注射对其进行 化学发光定量检测存在一定的困难。本文在酸性介质和高温条件下，以K2Cr207 在碱性条件下测定MCPM的化学发光新方法。结果表明，该方法对MCPM测 定的线性范围为1．0X 酌nL的MCPM连续8次测定的相对标准偏差为2．9％。该方法灵敏度较高、操 作简便，可成功应用于药片中MCPM含量的测定，为只溶于酸性介质的MCPM 等药物在碱性条件下进行化学发光检测奠定了良好的基础。 3、本章采用Fe304纳米材料固定一抗，AuYPs@C纳米复合材料固定二抗 和辣根过氧化物酶，并采用夹心免疫模式，以双螺旋管和盘管为反应器和分离 NPs优良的生物 器，实现了对人体免疫球蛋白IgG的超灵敏快速定量检测。Au 相容性为AuNPs@C纳米复合材料有效地保持蛋白质的活性奠定了基础；同时， Au NPs@C纳米复合材料的大比表面积为二抗及酶的高密度负载提供了良好平 台，使化学发光信号大大增强，提高了对目标分子检测的灵敏度。此外，利用 Fe304纳米粒子的磁性质实现了分析检测过程的自动化，以螺旋管为反应器有效 促进了免疫反应的快速进行，并且盘管分离器的使用实现了磁性纳米粒子夹心 摘要 免疫结合物与未结合二抗复合物的完全分离。本方法对人体免疫球蛋白IgG免 疫分析检测在10rain内即可完成，检测的线性范围为1．0-1000 ng／mL，检测限 为O．74 ng／mL。该分析方法快速、实用，可以广泛用于其他蛋白质和DNA的检 测。 4、提出一种制备石墨烯／鲁米诺纳米复合物的新方法，用壳聚糖将该复合物 固定在玻璃管中，构建了一种新型的化学发光传感器。本文中考察了常温混合、 高温混合、常温加EDC／NHS混合三种不同的石墨烯／鲁米诺纳米复合物制备方 法对传感器性能的影响，结果表明，常温下通过EDC／NHS将鲁米诺和石墨烯交 联的方法制备的纳米复合物对鲁米诺分子的固载量最大，对H202的响应最强。 考察了壳聚糖和溶胶一凝胶对石墨烯／鲁米诺纳米复合物的固定化对传感器性能 的影响，结果表明，壳聚糖能够更好地保持复合材料的化学发光活性，石墨烯／ X10-．0X10‘4 鲁米诺／壳聚糖膜传感器对H202的检测线性范围宽，在5．0 mol／L mol／L H21