亮氨酸拉链结构域在p57和actin+结合中的重要作用.pdfVIP

．718． 生物化学与生物物理进展Prog．Biochem．Biophys． 2005；32(8) 亮氨酸拉链结构域在p57与actin 结合中的重要作用串 刘长振何立沈庆涛李湘辉隋森芳” (清华大学生物科学与技术系，生物膜国家重点实验室，北京100084) 沉淀、细胞内免疫荧光共定位以及免疫印迹和吸光度扫描分析等实验技术，系统地研究了亮氨酸拉链结构域在 亮氨酸拉链结构域的点突变都可以显著降低p57同actin的结合能力．同时，体内和体外的半定量分析结果表明， 的结合中起到了重要作用． 关键词p57，actin结合活性，亮氨酸拉链结构域 学科分类号078，Q245 类coronin蛋白家族(coronin—likeproteinfamily)位点(actin．binding 是一类广泛存在于真核细胞生物中的肌动蛋白结合 family)t”．该家族第一 actin， 蛋白家族(actin．bindingprotein F—actin)的能力． 个成员coronin是在粘菌(Dictyosteliumdiscoideum) 中被发现的．研究表明，它在细胞移动(cell 其他种类的actin结合蛋白不具有序列相似性[1】．而 locomotion)、细胞吞噬(phagocytosis)以及胞浆移动 且在家族内部，其他成员也不具有p57这种多 (cytokinesis)等细胞活动中都起了重要的作用刚． actin结合位点(multipleactin—binding p57，又叫Hcoroninl，是第一个被鉴定出来的哺乳 动物类coronin蛋白嘲．它的结构特征是在中心区域 有一个与家族中其他成员相似的5WD(Trp—Asp)重 WD 测了蛋白质C端的LZ 复序列结构(5 repeatsdomain)，通常认为这个 结构可作为一个平台来介导蛋白质之问的相互作 过程中的作用．研究结果表明LZ 用旧．在p57的c端有一个家族中其他成员所没有actin结合的过程中起着非常重要的作用． domain，LZ 的亮氨酸拉链结构域(1eucine．zipper 1材料和方法 domain)阴．根据最近的报道，p57通过这个LZ 1．1材料 domain形成同源二聚体(homo—dimer)结构阎．在组 织分布上，与其他哺乳动物类coronin蛋白所具有 的广泛分布性不同，p57仅在淋巴样或骨髓样细胞 DNA 谱系(1ymphoid／myeloidlineage)中特异性分布[刀．连宝生物工程公司)；pfu 现已知p57的生理功能是它参与了细胞吞噬作 程技术服务有限公司)；胎牛血清，RPMI1640培 用(phagocytosis)，并且有研究表明它与肌动蛋白 4fast 养基(Hyclone公司)；GlutathioneSepharoseTM (actin)的结合是细胞吞噬过程中的一个重要步 骤[9Ⅻ．通过与actin的相互作用，p57可以将一些功 能蛋白诸如p47岫(NADPH氧化酶的一个亚基)等+国家重点基础研究发展规划项目(973)(