纳米金标记细管电泳超灵敏化学发光免疫分析及应用研究.pdfVIP

摘 要 纳米技术是2l世纪最重要的技术之一，它覆盖了多个领域，包括化学、物理、 材料科学、工程学、生物学，甚至医学。在过去的十年罩，纳米金(goldnanoparticles， AuNPs)在生物分子检测和临床诊断中的应用已经引起了高度重视，它具有易于合 成和表面修饰、强大的催化效应和容易与生物分子结合等优良性质。 毛细管电泳(capillary 细管为分离通道，以样品的多种特性为依据的高效分离分析技术，是继气相色谱(gas liquidchromatography, HPLC)之后分析科学的又一重大进展。CE具有分离效率高、样品消耗量低、分析 时间短等优点，是一种新颖的微量分离分析技术。 1|I 化学发光免疫分析法(chemiluminescence 复杂样品中的低浓度组分，已经广泛地应用于临床诊断研究。c域精合CL-IA将同 时具有CE的高分离能力、CL的高灵敏检测和认的高特异性，是分析复杂生物样 品的有效手段。 ． 本文首次将AuNPs标记、CE．CL．IA结合起来，发展了一种新颖的化学发光免 疫分析技术，主要研究内容和创新点如下： 1．首次利用AuNPs作为CL标记物用于毛细管电泳化学发光免疫分析。AuNPs 用来催化lumin01．H202反应，产生强的CL信号。非竞争免疫反应后，免疫复合物 和未反应的标记抗体(Ab。)经CE分离后先后流出毛细管，与CL试剂相遇产生发 光信号。我们选择常见的人免疫球蛋白G(human G immtmoglobulinhlgG)作为目 标抗原。在优化条件下，免疫复合物和Ab+在5 min内得到良好的分离。hIgG的线 性范围为0．008-5 pg／mL(R=0．9950)，检出限为1．14 ng／mL醛w=3)。IgO在人 血清中的加标回收率在85．0一107．o％之间。该方法成功应用于剜小血清中IgG的定 量检测。 、、 2．首次发现诺氟沙星和环丙沙星能够显著提高lumin01．H202化学发光体系的 l 发光强度。基于这种现象，建立了一种CE—CL高灵敏同时检测诺氟沙星和环丙沙星 的新方法。对CE分离和CL检测条件的影响进行了系统研究。在优化条件下，诺 氟沙星和环丙沙星在4．5min内基线分离。诺氟沙星和环丙沙星的检出限(S／N=3) 分别达到2．9×10邶和1．1×10mmol／L，在尿样分析中的定量限(S／N=10)分别为 6．0×10。8和5．1×10。10mol／L。两种分析物日内和日间迁移时间和峰面积的相对标准 偏差分别不高于3．6％和6．3％(n=6)。两种分析物在人尿样中的加标回收率在91．O％ 和112．7％之间。该方法成功应用于两种分析物在人尿样中的分离分析和环丙沙星在 人体中药代动力学的研究。 关键词：毛细管电泳；纳米金；化学发光免疫分析；人免疫球蛋白G；喹诺酮 类抗生素 Ⅱ Abstract 1 ofthecritical ofthe2st century，is Nanotechnology,onetechnologies and coversdiversefields and