家兔脂肪肝超声量化诊断的实验的分析.pdf

中文摘要 高营养及酒精联用喂养家兔脂肪肝 模型的病理组织学及超声量化诊断的研究 摘 要 脂肪肝及其相关疾病的患病率呈逐年上升趋势，其发病年龄趋于年 轻化。高达40％的非酒精性脂肪肝病因不明，且病程常呈隐匿性，一旦发 现，其伴同的炎症、坏死及纤维化已不同程度存在，部分患者在无明显肝 组织炎症和坏死的情况下合并肝纤维化。在脂肪肝诊断上肥胖、糖尿病、 高脂血症、饮酒等仅为脂肪肝的易患因素；肝功能异常及血脂增高：谷氨 异常。B型超声检查是目前脂肪肝诊断的首选方法，近年国内外有用超声 衰减率定量法取代肝活检和声学密度定量参数诊断脂肪肝的研究报告。当 前缺乏脂肪肝的病理过程、病变程度与超声特征及实验室检查的相关性研 究，临床亟待解决本病的临床诊断问题。 人类饮食的营养结构以高营养为主，饮酒为较普遍的行为，脂肪肝 的发病、尤其中青年多由高营养和酒精等复合因素导致，因此，模拟人 类膳食结构，建立高脂／高脂、高糖和酒精联合喂养的动物脂肪肝模型， 探讨其病理特征，并进一步采用临床适用的设备或器械，如超声诊断仪 和肝穿刺活检针等，进行脂肪肝病理组织学和影像学对比研究至关重要。 本课题研究对象选用新西兰家兔，研究内容包括以下四部分： 第一部分：家兔脂肪肝模型的建立及意义 目的：模拟人类饮食结构，采用高营养和酒精联合喂养的方法建立不同程 度的家兔脂肪肝模型，以进一步采用临床适用的设备或器械，如超声诊断 仪和肝穿刺活检针等，进行脂肪肝病理组织学和影像学对比研究，为脂肪 肝的无创性量化诊断奠定基础。 方法：选用新西兰纯种家兔60只，随机分成对照组和5个实验组：对照 组普通饲料及水喂养6周。实验1、2、3组分别采用含2％的胆固醇和5％ 的蔗糖饲料加酒精饮料喂养3周、6周和12周。实验4、5组采用2％的 胆固醇饲料加酒精饮料喂养6周和12周。检测肝功能、总胆固醇、甘油 中文摘要 三酯、高密度腊蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、血糖、血清总胆汁 酸及丁酰胆碱酯酶。肝组织标本进行苏丹IV染色观察脂肪变面积，HE son’S三色染色显示肝 染色观察脂肪变程度及炎症活动度，硫酸银、Mas 纤维化的程度。 结果：高脂(或及高糖)和酒精饮料喂养1周，家兔血脂即明显升高，至 mmol／L以上，TG呈递增趋势；血 2～3周后血清呈乳糜状，胆固醇达30 糖均显著高于对照组。肝功能的改变以球蛋白增高为主，白蛋白轻度减低， 酰胆碱酯酶呈增高趋势。脂肪肝家兔血清总胆汁酸均高于对照组，并随造 模时间的延长递增。肝组织学检查，于造模第l周即可见肝细胞内散在的 脂肪空泡形成，造模3周以上，脂肪肝形成率100％。实验1组50％形成轻 度脂肪肝，10％并发脂肪性肝炎，中、重度脂肪肝分别为30％和20％，均伴 有肝实质内炎症。实验2组20％为轻度脂肪肝伴有脂肪性肝炎，20％为中 度脂肪肝，重度脂肪肝伴炎症60％。实验4组20％形成轻度脂肪肝，中度 脂肪肝70％，重度脂肪肝10％，其中60％伴不同程度脂肪性肝炎表现。造 模至12周，实验3、5组动物均发生小叶中心大片肝纤维化、桥接纤维化 或肝硬化，肝脂肪变程度较前减轻。高脂、高糖加酒精喂养较单纯高脂加 酒精脂肪肝模型，病变形成快，随喂养时间延长，重度脂肪肝或伴发脂肪 性肝炎形成率较高。 结论：高脂+酒精饮料／高脂、高糖+酒精饮料模型符合人类脂肪肝形成 过程。模型复制率高、方法简便、易行：轻、中和重度脂肪肝均可发生肝 实质细胞损伤和炎症反应，进一步导致纤维化等严重病变发生；ALT、AST、 丁酰胆碱酯酶和血清总胆汁酸联合检测可反映脂肪肝的病变程度和预测 进展。 第二部分：家兔脂肪肝病理组织学研究 目的：探讨高营养和酒精等两种以上因素致病的病理组织学特点，为临床 诊治脂肪肝提供依据。 方法：建立脂肪肝模型，于实验结束时，称量体重及肝脏湿重，计算肝脏 指数。对所有肝组织Sudan 染色的组织切片病变进行分级分析，根据组织学病变特征分为单纯性脂肪 肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝纤维化和脂肪性肝硬化。脂肪变程度根据低倍 中文摘要 镜下肝细