还原敏感可核交联的聚合物胶束用于阿霉素的触发释放.pdfVIP

中文摘要 本论文用硫辛酸接枝的聚乙二醇-b-聚（N-2-羟丙基甲基丙烯酰胺）嵌段聚合物 （PEG-b-PHPMA-LA ）制备了还原敏感的核可逆交联的聚合物胶束。该胶束核中的 硫辛酸在催化量DTT 的作用下，硫硫键部分断开并重新形成新硫硫键，使胶束核发 生交联。核交联的胶束在高倍稀释、浓盐条件下具有很高的稳定性，但在模拟细胞内 的还原环境中很快解离，高效快速的释放出药物，达到治疗效果。为了提高载药胶束 的靶向性，我们在PEG-b-PHPMA-LA 聚合物中引入了不同量的含半乳糖靶向分子的 聚乙二醇-聚己内酯聚合物 （Gal-PEG-PCL ，含量：0～20 wt.% ），在水中自组装形成 混合胶束。混合胶束相似地可在在催化量DTT 的作用下发生核交联，从而得到具有 高稳定性和高靶向性的混合胶束。 （1）通过RAFT 聚合反应，以PEG-CPADN （M , = 5.0 kg/mol, CPADN: 二 n PEG 硫代萘甲酸- （4-氰基）戊酸酯）为大分子 RAFT 试剂合成了水溶性的嵌段聚合物聚 乙二醇-b-聚（N-2-羟丙基甲基丙烯酰胺），即 PEG-b-PHPMA 。核磁氢谱和凝胶色谱 测试显示 PHPMA 具有可控的分子量（1.7，4.1 ，7.0 kg/mol ）且分子量分布低 （1.17-1.25）。然后，通过酯化反应把硫辛酸接到聚（N-2-羟丙基甲基丙烯酰胺）链 段的羟基上，从而得到两亲性聚合物聚乙二醇-b-聚（N-2-羟丙基甲基丙烯酰胺）-硫 辛酸, 即 PEG-b-PHPMA-LA ，它们的取代度（DS ）为 71-86 % 。在水溶液中 PEG-b-PHPMA-LA 形成胶束的粒径在85.3 -142.5 nm 之间，临界胶束浓度为8.0-2.0 mg/L 。加入催化量（10 mol.%硫辛酸官能团）的DTT ，对胶束核进行交联。交联后 的胶束在稀释、生理浓度盐溶液的条件下仍然很稳定，但在类细胞内的还原环境（10 mM DTT ）下，聚合物胶束很快解交联。PEG-b-PHPMA(7.0k)-LA 聚合物胶束对阿霉 素的载药量为27 wt.% ，载药效率达90 % 。体外释放研究表明，交联的载阿霉素的 PEG-b-PHPMA(7.0k)-LA 聚合物胶束在生理条件下，24 小时仅释放了22.0 %的阿霉 素；而在10 mM DTT 的还原性环境下，24 小时后释放了90.1 % 。MTT 实验结果显 示，载阿霉素的核交联胶束在HeLa 细胞中显示了增强的抗肿瘤细胞效果，48 小时以 后的半致死浓度为6.7 µg DOX equiv./mL ，而空胶束当其浓度达到1.0 mg/mL 时仍然 没有毒性。共聚焦激光扫描显微镜（CLSM ）观察结果显示，载阿霉素的核交联胶束 I 中文摘要 还原敏感可逆核交联的聚合物胶束用于阿霉素的触发释放 在与HeLa 细胞孵育了 12 小时后，即可以将阿霉素输送到细胞核内。 （2 ）论文第三章主要研究了表面半乳糖（Gal ）修饰的、核可逆交联的新型生物 可降解聚合物胶束用于阿霉素的肝癌靶向释放。该胶束由聚乙二醇-b-聚（N-2-羟丙基 甲基丙烯酰胺）-硫辛酸（PEG-b-PHPMA-LA ）、偶联半乳糖的聚乙二醇-聚己内酯 （Gal-PEG-PCL ）两种聚合物组成。Gal-PEG-PCL 中的PEG 链段较 PEG-PAC-PCL 聚合物中的分子量高，从而使Gal 充分裸露在胶束表面，提高胶束的靶向性。在水溶 液中PEG-b-PHPMA(7.0k)-LA/Gal-PEG-PCL （Gal-PEG-PCL 含量为0-20 wt.% ）形成 靶向性胶束，胶束的粒径在 142.5-201.2 nm 之间。加入催化量（硫辛酸官能团 10 mol.% ）的DTT 后得到核交联的胶束。该胶束在稀释、生理浓度盐溶液中很稳定，但 在类细胞内的还原环境（10 mM DTT ）下，