苯并噁二唑荧光针和荧光dna传感器用于汞铜铅的检测.pdfVIP

中文摘要 近年来，重金属离子污染对环境和生物体造成了很大的威胁， 有关重金属离子中毒的事件也屡见报道。所以，重金属离子的检测 尤为重要。在众多的检测方法中，荧光传感器因具有较高的灵敏度， 良好的选择性、再现性、较宽的线性范围、易于操作且可用于活体 细胞检测等优点而得到广泛的应用。其中，荧光分子探针是近年来 发展比较迅速的一类检测方法，因为其易于合成、操作简单、选择 性好并且能够重复利用。而核酸适体和DNAzyme更是由于其特异 性强、目标广泛、易于合成和修饰等优点而备受关注。本论文基于 荧光分子探针和荧光DNA传感器设计了三种重金属离子的检测方 法。主要内容如下： 1．设计合成了一种对H92+响应的荧光增强型的苯并嗯二唑荧 光探针，研究了该探针分子对H92+识别的荧光光谱性质。同时，通 过荧光离子滴定实验对其选择性和抗干扰能力进行了系统研究，并 通过Job曲线和质谱研究了可能的检测机理。研究表明：该探针是 一种灵敏度较好且选择性高的“OFF．ON’型荧光探针，可实现对水溶 液和细胞中汞离子的检测。 2．SYBR Greenl能够嵌入双链DNA中使荧光增强，但是不能 嵌入铅离子的适配体PS2．M形成的G四分体中，基于此我们构建了 一种简单无标记的铅离子荧光适体传感器。在没有Pb2+存在时， SYBR Greenl嵌入铅离子的适配体及其互补链形成的双链中，荧光 得到很大的增强。当Pb2+存在时，Pb2+与其适配体结合形成紧密的G 四分体结构，双链结构被破坏，SYBR Greenl从双链中释放成为游 离态，荧光减弱。该传感器检测限为3nM，灵敏度高，选择性好且 成本低。 Greenl构建了一种简单无标记且灵敏度高选择性好的铜离子荧光传 感器。铜离子的DNAzyme是由一条酶链和一条基底链杂交形成的， 其中含有一个双链区和一个三倍体区，在没有Cu2+存在时，SYBR Greenl可以嵌入这两个区域，且荧光得到很大的增强。但当Cu2+存 在时，Cu2+可以诱导酶链催化断裂基底链，DNAzyme结构被破坏， SYBR Greenl从DNAzyme的双链和三倍体区域释放成为游离态， 荧光减弱。SYBRGreenl的荧光随着Cu2+浓度的增大而减弱，从而 建立了一种“ON．OFF型荧光传感器。该法检测铜离子的检测限低至 10 nM，并成功应用于饮用水中铜离子的检测。 关键词：荧光分子探针；适体；DNAzyme；未标记；重金属离子 ABSTRACT Pollution metalshascaused threattothe byheavy great environment and inrecent eventsof livingsystems years．The heavy metalions were detection poisoningfrequently reported．Therefore，the of metalionsis detection heavy particularlyimportant．In methods， many fluorescent obtainsawide of ithas technique rangeapplications，for high and widelinear