功能化磁性纳米子对糖蛋白的分离富集以及唾液酸衍生物合成的研究.pdfVIP

摘要 蛋白质的糖基化是蛋白质重要的翻译后修饰之一，对于蛋白质的 结构和功能具有非常重要的影响，调控着细胞的许多重要生命过程， 是许多临床的生物标志物及治疗的靶标，糖蛋白的研究在生物学和临 床医学领域具有非常重要的意义。 糖蛋白组学的研究对象一般都是复杂的生物样品体系，低丰度和 微观结构的不均一性，使得糖蛋白的分离富集是糖蛋白组学的重点和 难点。绪论对糖蛋白的分离富集的几种方法做了简要介绍，重点介绍 了分离富集糖蛋白的常用化学反应方法。 本论文主要针对糖蛋白的分离和富集的问题开展了研究。利用本 研究组制备的具可切割的氧氨基功能基团的磁性纳米粒子对糖蛋白 进行了分离富集。磁性纳米粒子上的氧氨基官能团能与唾液酸甘油侧 链的邻二醇被高碘酸钠氧化生成的醛基选择性的反应，将糖蛋白富集 到磁性纳米粒子上，而可切割的二硫键能在不破坏糖基片段的情况下 将糖蛋白释放出来。论文讨论了温度，时间，催化剂，还原剂，pH 值，氧化剂的浓度对分离和富集的影响，优化并确立了选择性分离富 集糖蛋白的条件。 本论文还以唾液酸为起始原料，通过选择性保护与脱保护的方 法，在唾液酸的9号位置上引入醛基和叠氮，后续工作将用引入叠氮 的唾液酸衍生物对细胞进行代谢标记，再准备与具可切割的炔基功能 万方数据 化的磁性纳米粒子反应，通过点击化学将代谢标记的唾液酸化糖蛋白 或糖缀合物进行分离富集。 本论文的工作确立了选择性分离和富集糖蛋白的条件，为在复杂 生物样品中的应用提供了实验数据。 关键词：唾液酸；磁性微粒；糖蛋白；分离和富集；氧氨基 II 万方数据 ABSTRACT Protein isoneofthemost glycosylation importantpost—translation crucialeffectonstructureand modifications，has clinicalbiomarkers regulatemanyimportantbiologicalprocesses．Many and are of therapeutictargets study has very glycoproteinsimportantbiologicalsignificance． The of researchare targetsglycoproteiomicscomplexbiological abundanceand of samples．Low microheterogenit=y the andenrichmentof difficult．Themethods separation glycoproteins in andenrichmenthavebeen appliedglycoproteinseparation introduced， with onchemicalmethods． emphasis