干扰素-γ抗肝纤维化动物实验与临床研究.pdf

射IFN-T，每天1次，连用8周：秋水仙碱用生理盐水溶解，按0．1mg／kg体重灌胃。 每天1次，连用8周；模型对照组、正常对照组以生理盐水代替，『司样方法处理。 治疗期间继续使用CCI．维持大鼠肝纤维化程度直到实验结束。治疗8周后各组随机 取lo只大鼠解割取肝脏和血靖进行检测，观察疗效。余下大鼠停止治疗，继续观 察4周至实验结束，处死所有大鼠，解剖取肝脏和血清进行检测。 DMN大鼠肝纤维化模型组 次，实验第l周连续用药3d，每天1次：后5周每周连续用药2d，共6周，每周 末杀5只大鼠观察病理改变，直到中度肝纤维化形成。实验第4周末，大鼠肝纤维 化模型建成，将余下的196只SD大鼠，随机分成5组。其中，IFN-T大、中、小 剂量治疗组各40只，秋水仙碱治疗组30只，DMN模型对照对照组46只，另设正 IFN-T，每天1次，连用4周；秋水仙碱用生理盐水溶解，按0．1mg／kg体重灌胃， 每天1次，连用4周：染毒对照组、正常对照组以生理盐水代替。治疗4周后各组 随机取10只大鼠解剖取肝脏和血清检测，观察疗效。 检测指标 (一)病理组织学检查：分别进行HE、天狼猩红染色和Masson染色，按1995 年全国肝炎防治会议制订的标准和肝纤维化组织学半定量计分系统(SSS)标准观 察肝纤维化变化情况。偏光显微镜下观察胶原分布情况，计算机图像分析系统于偏 光显微镜下测胶原面积。同时，还采用王宝恩等报道的肝纤维化病理分级判定标准 观察纤维化分级。 (二)0t．SMA免疫组化染色 (三)肝Hyp含量测定 (四)血清HA及常规肝功能试验测定 统计方法 2 用SPSS7．0对定量资料进行方差分析，病理学半定量资料用KruskM-Wallis检 验。 结 果 一、各组大鼠的死亡情况显示IFNq治疗后的各组大鼠死亡数较少 二、治疗结束时组织学检查结果显示IFNq治疗后大鼠肝纤维化程度较模型组 和秋水仙碱治疗组明显下降，三组间的疗效随剂量增加而显著 程度比较模型组均有显著差异(JP0．05)，但疗效以IFN．Y大剂量治疗组最优，IFN叶 中、小剂量治疗组次之，秋水仙碱再次之，三者间均有显著差异(P0．05)，IFN．v中、 小剂量治疗组之间无明显差异(JP0．05)。 三、CCI。模型组停止IFNq治疗4周后，大鼠肝脏肝纤维化程度较治疗结束 时均有上升，上升程度与使用的剂量有关．接受治疗的剂量越大，肝纤维化上升程 度越小。 CCI。模型组实验第16周(停止治疗4周后)，模型对照组所有大鼠纤维化分级 均超过4级，说明不进行治疗，模型对照组肝纤维化程度进一步加重。 治疗结束时，IFN吖大剂量治疗组大鼠纤维化分级均未超过4级，停药4周后， 3只大鼠纤维化分级超过4级(20％)。 治疗结束时，IFNq中剂量治疗组有1只大鼠纤维化分级超过4级(10％)， 停药4周后，6只大鼠纤维化分级超过4级(42．9％)。 治疗结束时，IFN吖小剂量治疗组有3只大鼠纤维化分级超过4级(30％)， 停药4周后，IFNq大剂量治疗组有5只大鼠纤维化分级超过4级(38．5％)。 四、肝脏Hyp含量和血清HA水平测定与组织学的结果一致 IFN—Y治疗后肝纤维化大鼠肝脏Hyp含量和血清HA水平较模型组和秋水仙碱 治疗组大鼠明显下降。下降程度与IFN吖的剂量有关，使用剂量越大，肝脏Hyp含 3 量和血清HA水平下降越明显。又 结 论 (1)IFN-y对实验性肝纤维化有确定疗效； (2)动物实验中，IFN-y的疗效与使用剂量有关； (3)IFN．Y停止治疗后实验动物的肝纤维化程度可逆。 第二部分临床研究 f1、 通过开放、随机、对照的多中心研究重点观察IFN吖治疗慢性乙型肝炎肝纤维 化前后的组织学变化，结合血清学、影像学及临床症状体征观察，以此证明IFN—y治 疗慢性乙型病毒性肝炎的I临床疗效。 ———，————————————一 厂／ 病人与方法 、、 99例慢性乙型病毒性肝炎患者按照下列标准入选临床研究：慢性乙型肝